寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2012年
4期
235-240
,共6页
秦顺晴%曹杰%周勇志%张厚双%周金林
秦順晴%曹傑%週勇誌%張厚雙%週金林
진순청%조걸%주용지%장후쌍%주금림
免疫球蛋白结合蛋白%昆虫细胞表达%镰形扇头蜱
免疫毬蛋白結閤蛋白%昆蟲細胞錶達%鐮形扇頭蜱
면역구단백결합단백%곤충세포표체%렴형선두비
蜱吸食宿主大量血液,其中宿主血液中IgG分子能穿过蜱肠道,进入血淋巴,且能保持其活性.为逃避宿主免疫攻击,蜱唾液腺分泌一种免疫球蛋白结合蛋白(Immunoglobulin G binding protein,IGBP),与蜱体内的宿主IgG结合,抑制宿主IgG对蜱的损害,是蜱唾液腺重要的功能分子,也是抗蜱疫苗候选分子.镰形扇头蜱是我国南方的优势蜱种,其唾液腺免疫球蛋白结合蛋白(RH-IGBP)被鉴定为抗蜱免疫保护性抗原,为进一步了解其生物学功能,本研究应用杆状病毒表达系统,构建出重组杆粒Bacmid-IGBP,并在昆虫细胞中表达出真核重组蛋白RH-IGBP,经免疫荧光实验鉴定和Western blot分析,重组蛋白大小为23kDa,与预期一致.重组蛋白经纯化,利用ELISA方法,研究重组蛋白与不同哺乳动物宿主(兔、猪、牛羊、鼠、犬)和人的IgG结合能力,发现RH-IGBP与不同宿主IgG结合能力不同,与兔、猪的IgG有明显结合能力.对来自兔源IgG不同酶切片段F(ab′)2 和Fc与RH-IGBP结合特性分析表明,蜱IgG结合蛋白主要识别部位是IgG的F(ab′)2片段.这些结果初步揭示了蜱IgG结合蛋白的作用机制和特点.
蜱吸食宿主大量血液,其中宿主血液中IgG分子能穿過蜱腸道,進入血淋巴,且能保持其活性.為逃避宿主免疫攻擊,蜱唾液腺分泌一種免疫毬蛋白結閤蛋白(Immunoglobulin G binding protein,IGBP),與蜱體內的宿主IgG結閤,抑製宿主IgG對蜱的損害,是蜱唾液腺重要的功能分子,也是抗蜱疫苗候選分子.鐮形扇頭蜱是我國南方的優勢蜱種,其唾液腺免疫毬蛋白結閤蛋白(RH-IGBP)被鑒定為抗蜱免疫保護性抗原,為進一步瞭解其生物學功能,本研究應用桿狀病毒錶達繫統,構建齣重組桿粒Bacmid-IGBP,併在昆蟲細胞中錶達齣真覈重組蛋白RH-IGBP,經免疫熒光實驗鑒定和Western blot分析,重組蛋白大小為23kDa,與預期一緻.重組蛋白經純化,利用ELISA方法,研究重組蛋白與不同哺乳動物宿主(兔、豬、牛羊、鼠、犬)和人的IgG結閤能力,髮現RH-IGBP與不同宿主IgG結閤能力不同,與兔、豬的IgG有明顯結閤能力.對來自兔源IgG不同酶切片段F(ab′)2 和Fc與RH-IGBP結閤特性分析錶明,蜱IgG結閤蛋白主要識彆部位是IgG的F(ab′)2片段.這些結果初步揭示瞭蜱IgG結閤蛋白的作用機製和特點.
비흡식숙주대량혈액,기중숙주혈액중IgG분자능천과비장도,진입혈림파,차능보지기활성.위도피숙주면역공격,비타액선분비일충면역구단백결합단백(Immunoglobulin G binding protein,IGBP),여비체내적숙주IgG결합,억제숙주IgG대비적손해,시비타액선중요적공능분자,야시항비역묘후선분자.렴형선두비시아국남방적우세비충,기타액선면역구단백결합단백(RH-IGBP)피감정위항비면역보호성항원,위진일보료해기생물학공능,본연구응용간상병독표체계통,구건출중조간립Bacmid-IGBP,병재곤충세포중표체출진핵중조단백RH-IGBP,경면역형광실험감정화Western blot분석,중조단백대소위23kDa,여예기일치.중조단백경순화,이용ELISA방법,연구중조단백여불동포유동물숙주(토、저、우양、서、견)화인적IgG결합능력,발현RH-IGBP여불동숙주IgG결합능력불동,여토、저적IgG유명현결합능력.대래자토원IgG불동매절편단F(ab′)2 화Fc여RH-IGBP결합특성분석표명,비IgG결합단백주요식별부위시IgG적F(ab′)2편단.저사결과초보게시료비IgG결합단백적작용궤제화특점.
