医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2012年
4期
262-266
,共5页
邓飞涛%葛凉芳%杨昀%李彦旭%柴新群
鄧飛濤%葛涼芳%楊昀%李彥旭%柴新群
산비도%갈량방%양윤%리언욱%시신군
多形性腺瘤样基因2%甲状腺转录因子-1%SP-C基因启动子%荧光素酶活性检测%凝胶电泳迁移实验%实时荧光PCR
多形性腺瘤樣基因2%甲狀腺轉錄因子-1%SP-C基因啟動子%熒光素酶活性檢測%凝膠電泳遷移實驗%實時熒光PCR
다형성선류양기인2%갑상선전록인자-1%SP-C기인계동자%형광소매활성검측%응효전영천이실험%실시형광PCR
目的 研究甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor 1,TTF-1)对表面活性蛋白C(pulmonary surfactant-asso-ciated protein C,SP-C)基因启动子的调控作用及多形性腺瘤样基因2(pleiomorphic adenoma gene like -2,PLAGL2)对TTF-1结合SP-C基因启动子能力影响.方法 应用体外细胞共转染后荧光素酶报告基因活性值检测技术研究TTF-1对SP-C基因启动子转录活性的调控及PLAGL2的影响作用;利用凝胶电泳迁移实验(EMSA)研究TTF-1对SP-C基因启动子靶点的结合及PLAGL2的影响作用;应用实时荧光PCR技术检测PLAGL2、TTF-1、SP-C在人胚肺和成熟小鼠肺Ⅱ型上皮细胞中mRNA水平.结果 TTF-1明显提高SP-C基因启动子荧光素酶活性值(P<0.01),而共转染PLAGL2后则明显降低SP-C基因启动子荧光素酶活性值(P<0.01);TTF-1能与同位素标记的SP-C基因启动子片段结合形成TTF-1- SP-C DNA 蛋白复合物,PLAGL2则明显降低该蛋白复合物形成;TTF-1、SP-C基因mRNA水平随胚肺孕周逐渐升高,PLAGL2基因mRNA水平随胚肺孕周逐渐减少.结论 在肺Ⅱ型细胞中TTF-1对SP-C基因表达具有促进作用,PLAGL2则对该作用产生明显抑制影响.
目的 研究甲狀腺轉錄因子-1(thyroid transcription factor 1,TTF-1)對錶麵活性蛋白C(pulmonary surfactant-asso-ciated protein C,SP-C)基因啟動子的調控作用及多形性腺瘤樣基因2(pleiomorphic adenoma gene like -2,PLAGL2)對TTF-1結閤SP-C基因啟動子能力影響.方法 應用體外細胞共轉染後熒光素酶報告基因活性值檢測技術研究TTF-1對SP-C基因啟動子轉錄活性的調控及PLAGL2的影響作用;利用凝膠電泳遷移實驗(EMSA)研究TTF-1對SP-C基因啟動子靶點的結閤及PLAGL2的影響作用;應用實時熒光PCR技術檢測PLAGL2、TTF-1、SP-C在人胚肺和成熟小鼠肺Ⅱ型上皮細胞中mRNA水平.結果 TTF-1明顯提高SP-C基因啟動子熒光素酶活性值(P<0.01),而共轉染PLAGL2後則明顯降低SP-C基因啟動子熒光素酶活性值(P<0.01);TTF-1能與同位素標記的SP-C基因啟動子片段結閤形成TTF-1- SP-C DNA 蛋白複閤物,PLAGL2則明顯降低該蛋白複閤物形成;TTF-1、SP-C基因mRNA水平隨胚肺孕週逐漸升高,PLAGL2基因mRNA水平隨胚肺孕週逐漸減少.結論 在肺Ⅱ型細胞中TTF-1對SP-C基因錶達具有促進作用,PLAGL2則對該作用產生明顯抑製影響.
목적 연구갑상선전록인자-1(thyroid transcription factor 1,TTF-1)대표면활성단백C(pulmonary surfactant-asso-ciated protein C,SP-C)기인계동자적조공작용급다형성선류양기인2(pleiomorphic adenoma gene like -2,PLAGL2)대TTF-1결합SP-C기인계동자능력영향.방법 응용체외세포공전염후형광소매보고기인활성치검측기술연구TTF-1대SP-C기인계동자전록활성적조공급PLAGL2적영향작용;이용응효전영천이실험(EMSA)연구TTF-1대SP-C기인계동자파점적결합급PLAGL2적영향작용;응용실시형광PCR기술검측PLAGL2、TTF-1、SP-C재인배폐화성숙소서폐Ⅱ형상피세포중mRNA수평.결과 TTF-1명현제고SP-C기인계동자형광소매활성치(P<0.01),이공전염PLAGL2후칙명현강저SP-C기인계동자형광소매활성치(P<0.01);TTF-1능여동위소표기적SP-C기인계동자편단결합형성TTF-1- SP-C DNA 단백복합물,PLAGL2칙명현강저해단백복합물형성;TTF-1、SP-C기인mRNA수평수배폐잉주축점승고,PLAGL2기인mRNA수평수배폐잉주축점감소.결론 재폐Ⅱ형세포중TTF-1대SP-C기인표체구유촉진작용,PLAGL2칙대해작용산생명현억제영향.