医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2012年
4期
252-256
,共5页
张媛%韩腾龙%赖晓凤%张健%刘文超%药立波
張媛%韓騰龍%賴曉鳳%張健%劉文超%藥立波
장원%한등룡%뢰효봉%장건%류문초%약립파
MDR1%慢病毒表达载体%MDA-MB-231%MCF-7
MDR1%慢病毒錶達載體%MDA-MB-231%MCF-7
MDR1%만병독표체재체%MDA-MB-231%MCF-7
目的 构建MDR1基因的过表达慢病毒载体并进行病毒的包装,为进一步深入的研究MDR1基因在乳腺癌耐药中的作用提供基础工具.方法用PCR 技术获得MDR1基因片段,将其连接入酶切后的慢病毒载体,转化感受态进行PCR及测序鉴定,脂质体转染293T细胞,包装成慢病毒再分别感染靶细胞MDA-MB-231和MCF-7细胞验证其生物学功能.结果 成功构建MDR1慢病毒表达载体,测序证实所获取基因序列完全正确,Western印迹验证在乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7稳转MDR1细胞系中MDR1基因高表达.通过药物杀伤实验验证稳转MDR1细胞组较对照组耐药性显著增高.结论 MDR1慢病毒表达载体的成功构建及病毒包装完成为进一步深入研究MDR1基因在乳腺癌多药耐药过程中的作用奠定了基础.
目的 構建MDR1基因的過錶達慢病毒載體併進行病毒的包裝,為進一步深入的研究MDR1基因在乳腺癌耐藥中的作用提供基礎工具.方法用PCR 技術穫得MDR1基因片段,將其連接入酶切後的慢病毒載體,轉化感受態進行PCR及測序鑒定,脂質體轉染293T細胞,包裝成慢病毒再分彆感染靶細胞MDA-MB-231和MCF-7細胞驗證其生物學功能.結果 成功構建MDR1慢病毒錶達載體,測序證實所穫取基因序列完全正確,Western印跡驗證在乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7穩轉MDR1細胞繫中MDR1基因高錶達.通過藥物殺傷實驗驗證穩轉MDR1細胞組較對照組耐藥性顯著增高.結論 MDR1慢病毒錶達載體的成功構建及病毒包裝完成為進一步深入研究MDR1基因在乳腺癌多藥耐藥過程中的作用奠定瞭基礎.
목적 구건MDR1기인적과표체만병독재체병진행병독적포장,위진일보심입적연구MDR1기인재유선암내약중적작용제공기출공구.방법용PCR 기술획득MDR1기인편단,장기련접입매절후적만병독재체,전화감수태진행PCR급측서감정,지질체전염293T세포,포장성만병독재분별감염파세포MDA-MB-231화MCF-7세포험증기생물학공능.결과 성공구건MDR1만병독표체재체,측서증실소획취기인서렬완전정학,Western인적험증재유선암MDA-MB-231화MCF-7은전MDR1세포계중MDR1기인고표체.통과약물살상실험험증은전MDR1세포조교대조조내약성현저증고.결론 MDR1만병독표체재체적성공구건급병독포장완성위진일보심입연구MDR1기인재유선암다약내약과정중적작용전정료기출.
