重组真核质粒pEGFP-C2-hTudor-SN-SN(1~4)的构建及表达
중조진핵질립pEGFP-C2-hTudor-SN-SN(1~4)적구건급표체
Construction and Expression of Recombinant Eukaryotic Plasmid pEGFP-C2-hTudor-SN-SN(1~4)
  • 万方数据
    医学分子生物学杂志 의학분자생물학잡지
    FOREIGN MEDICAL SCIENCES
    2012年 4期 241-245 ,共5页

    辛灵彪%高星杰%付雪%张毅%史雪彬%陈朴%尹洁%何津岩%杨洁

    신령표%고성걸%부설%장의%사설빈%진박%윤길%하진암%양길

    人类Tudor-SN蛋白%pEGFP-C2%重组质粒%融合蛋白 人類Tudor-SN蛋白%pEGFP-C2%重組質粒%融閤蛋白
    인류Tudor-SN단백%pEGFP-C2%중조질립%융합단백
    目的 将人类Tudor-SN(tudor staphylococcal nuclease)蛋白SN(1~4)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使Tudor-SN蛋白SN各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达.方法 以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的 基因,利用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切法将目的 片段连接到pEGFP-C2载体上,再将构建成功的pEGFP-C2- Tudor-SN-SN (1~4)重组质粒转染入HeLa细胞内,以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的 蛋白的融合表达情况.结果 以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达.结论重组pEGFP-C2- hTudor-SN-SN (1~4)质粒成功构建并表达.
    목적 장인류Tudor-SN(tudor staphylococcal nuclease)단백SN(1~4)기인편단분별정향련입pEGFP-C2질립,사Tudor-SN단백SN각공능편단여록색형광단백재HeLa세포내융합표체.방법 이중조질립pSG5-Tudor-SN-flag위모판,PCR법확증출목적 기인,이용EcoRⅠ화SalⅠ쌍매절법장목적 편단련접도pEGFP-C2재체상,재장구건성공적pEGFP-C2- Tudor-SN-SN (1~4)중조질립전염입HeLa세포내,이형광현미경급Western인적법검측록색형광단백여목적 단백적융합표체정황.결과 이단/쌍매절급기인측서법감정구건적중조질립균무오,형광현미경급Western인적결과균검측도록색융합단백적표체.결론중조pEGFP-C2- hTudor-SN-SN (1~4)질립성공구건병표체.
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