人pEGFP-C2-PRDX3真核表达载体构建与在人髓母细胞瘤DAOY细胞中表达
인pEGFP-C2-PRDX3진핵표체재체구건여재인수모세포류DAOY세포중표체
Construction of human eukaryotic expression vector pEGFP-C2-PRDX3 and its expression in human medulloblastoma DAOY cells
  • 万方数据
    临床与实验病理学杂志 림상여실험병이학잡지
    CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
    2012年 12期 1325-1328 ,共4页

    王晓玫%金红涛%成志强%彭全洲%胡锦涛%高利昆%许静%张石芬%曾照成%刘汉勇

    왕효매%금홍도%성지강%팽전주%호금도%고리곤%허정%장석분%증조성%류한용

    pEGFP-C2质粒%PRDX3%DAOY细胞%真核表达载体 pEGFP-C2質粒%PRDX3%DAOY細胞%真覈錶達載體
    pEGFP-C2질립%PRDX3%DAOY세포%진핵표체재체
    目的 构建人pEGFP-C2-PRDX3真核表达载体,并检测其在人髓母细胞瘤DAOY细胞中的表达.方法 从人髓母细胞瘤DAOY细胞中提取总RNA,采用RT-PCR法对编码PRDX3的基因片段进行扩增,应用基因重组技术,将目的 片段亚克隆到pEGFP-C2真核表达载体,经PCR、酶切和测序鉴定后,用脂质体法将重组质粒转染入DAOY细胞,分别采用RT-PCR法、Western blot法检测PRDX3在DAOY细胞中的表达.结果 双酶切及测序结果验证PRDX3片段正确插入pEGFP-C2质粒,转染后的PRDX3基因mRNA及蛋白质水平均明显上调.结论 成功构建了具有报告基因-增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的真核表达载体pEGFP-C2-PRDX3,为进一步研究PRDX3基因在人髓母细胞瘤中的生物学功能奠定了基础.
    목적 구건인pEGFP-C2-PRDX3진핵표체재체,병검측기재인수모세포류DAOY세포중적표체.방법 종인수모세포류DAOY세포중제취총RNA,채용RT-PCR법대편마PRDX3적기인편단진행확증,응용기인중조기술,장목적 편단아극륭도pEGFP-C2진핵표체재체,경PCR、매절화측서감정후,용지질체법장중조질립전염입DAOY세포,분별채용RT-PCR법、Western blot법검측PRDX3재DAOY세포중적표체.결과 쌍매절급측서결과험증PRDX3편단정학삽입pEGFP-C2질립,전염후적PRDX3기인mRNA급단백질수평균명현상조.결론 성공구건료구유보고기인-증강록색형광단백(EGFP)기인적진핵표체재체pEGFP-C2-PRDX3,위진일보연구PRDX3기인재인수모세포류중적생물학공능전정료기출.
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