中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
12期
1068-1072
,共5页
李淑莲%蔡静%张舒曼%刘广超%马远方
李淑蓮%蔡靜%張舒曼%劉廣超%馬遠方
리숙련%채정%장서만%류엄초%마원방
死亡受体5%单克隆抗体%凋亡%线粒体
死亡受體5%單剋隆抗體%凋亡%線粒體
사망수체5%단극륭항체%조망%선립체
目的:探讨抗人死亡受体5(Death receptor 5,DR5)单克隆抗体mDRA-6诱导Jurkat和U937细胞凋亡的线粒体信号通路.方法:MTT 法检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞生长增殖的影响,以及caspase-9、3抑制剂对mDRA-6抑制Jurkat和U937细胞生长增殖的影响;琼脂糖凝胶电泳检测Jurkat和U937细胞DNA片段化降解;Western blot 检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞bax、bcl-2、bcl-xl、Cyt c及caspase-9、3的激活改变.结果:mDRA-6呈时间、浓度依赖性地抑制Jurkat和U937细胞的生长增殖,10 mg/L的mDRA-6作用6、8和10小时,Jurkat细胞增殖抑制率分别达59.38%、72.56%和76.28%,U937细胞增殖抑制率分别达38.67%、47.54%和50.59%.琼脂糖凝胶电泳显示,10 mg/L的mDRA-6作用6小时,Jurkat和U937细胞均呈现凋亡细胞特有的DNA梯形条带; Western blot检测结果发现,随着mDRA-6作用时间延长,Jurkat和U937细胞内促凋亡分子bax增多,抗凋亡分子bcl-2及bcl-xl减少,Cyt c释放明显增多,同时 caspase-9、caspase-3也显示明显的激活表现.预先使用caspase-9抑制剂孵育细胞1小时,mDRA-6所致Jurkat和U937细胞生长抑制率分别降低了24.36%(t=5.44,P﹤0.01)和20.82%(t=4.29,P﹤0.01),mDRA-6所致Jurkat和U937细胞凋亡率分别降低了32.89%和23.97%.结论:线粒体信号通路激活是抗人死亡受体5(Death receptor 5,DR5)单克隆抗体mDRA-6诱导Jurkat和U937细胞凋亡的途径之一.
目的:探討抗人死亡受體5(Death receptor 5,DR5)單剋隆抗體mDRA-6誘導Jurkat和U937細胞凋亡的線粒體信號通路.方法:MTT 法檢測mDRA-6對Jurkat和U937細胞生長增殖的影響,以及caspase-9、3抑製劑對mDRA-6抑製Jurkat和U937細胞生長增殖的影響;瓊脂糖凝膠電泳檢測Jurkat和U937細胞DNA片段化降解;Western blot 檢測mDRA-6對Jurkat和U937細胞bax、bcl-2、bcl-xl、Cyt c及caspase-9、3的激活改變.結果:mDRA-6呈時間、濃度依賴性地抑製Jurkat和U937細胞的生長增殖,10 mg/L的mDRA-6作用6、8和10小時,Jurkat細胞增殖抑製率分彆達59.38%、72.56%和76.28%,U937細胞增殖抑製率分彆達38.67%、47.54%和50.59%.瓊脂糖凝膠電泳顯示,10 mg/L的mDRA-6作用6小時,Jurkat和U937細胞均呈現凋亡細胞特有的DNA梯形條帶; Western blot檢測結果髮現,隨著mDRA-6作用時間延長,Jurkat和U937細胞內促凋亡分子bax增多,抗凋亡分子bcl-2及bcl-xl減少,Cyt c釋放明顯增多,同時 caspase-9、caspase-3也顯示明顯的激活錶現.預先使用caspase-9抑製劑孵育細胞1小時,mDRA-6所緻Jurkat和U937細胞生長抑製率分彆降低瞭24.36%(t=5.44,P﹤0.01)和20.82%(t=4.29,P﹤0.01),mDRA-6所緻Jurkat和U937細胞凋亡率分彆降低瞭32.89%和23.97%.結論:線粒體信號通路激活是抗人死亡受體5(Death receptor 5,DR5)單剋隆抗體mDRA-6誘導Jurkat和U937細胞凋亡的途徑之一.
목적:탐토항인사망수체5(Death receptor 5,DR5)단극륭항체mDRA-6유도Jurkat화U937세포조망적선립체신호통로.방법:MTT 법검측mDRA-6대Jurkat화U937세포생장증식적영향,이급caspase-9、3억제제대mDRA-6억제Jurkat화U937세포생장증식적영향;경지당응효전영검측Jurkat화U937세포DNA편단화강해;Western blot 검측mDRA-6대Jurkat화U937세포bax、bcl-2、bcl-xl、Cyt c급caspase-9、3적격활개변.결과:mDRA-6정시간、농도의뢰성지억제Jurkat화U937세포적생장증식,10 mg/L적mDRA-6작용6、8화10소시,Jurkat세포증식억제솔분별체59.38%、72.56%화76.28%,U937세포증식억제솔분별체38.67%、47.54%화50.59%.경지당응효전영현시,10 mg/L적mDRA-6작용6소시,Jurkat화U937세포균정현조망세포특유적DNA제형조대; Western blot검측결과발현,수착mDRA-6작용시간연장,Jurkat화U937세포내촉조망분자bax증다,항조망분자bcl-2급bcl-xl감소,Cyt c석방명현증다,동시 caspase-9、caspase-3야현시명현적격활표현.예선사용caspase-9억제제부육세포1소시,mDRA-6소치Jurkat화U937세포생장억제솔분별강저료24.36%(t=5.44,P﹤0.01)화20.82%(t=4.29,P﹤0.01),mDRA-6소치Jurkat화U937세포조망솔분별강저료32.89%화23.97%.결론:선립체신호통로격활시항인사망수체5(Death receptor 5,DR5)단극륭항체mDRA-6유도Jurkat화U937세포조망적도경지일.