西南国防医药
西南國防醫藥
서남국방의약
MEDICAL JOURNAL OF NATIONAL DEFENDING FORCES IN SOUTHWEST CHINA
2013年
1期
8-11
,共4页
王艳%胡翰青%邢红艳%翁雁鸣%刘彦普%刘斌
王豔%鬍翰青%邢紅豔%翁雁鳴%劉彥普%劉斌
왕염%호한청%형홍염%옹안명%류언보%류빈
骨髓%间充质干细胞%小鼠%流式细胞术%诱导分化
骨髓%間充質榦細胞%小鼠%流式細胞術%誘導分化
골수%간충질간세포%소서%류식세포술%유도분화
目的 分离培养鉴定小鼠的骨髓间充质干细胞,观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力.方法 采用全骨髓培养法培养小鼠骨髓间充质干细胞,观察干细胞的形态和生长特性,用流式细胞仪对其细胞表型CD29、CD90、CD34、CD44、CD31、CD45进行鉴定,成脂成骨诱导分化能力鉴定.结果 原代分离的细胞培养24 h,干细胞开始贴壁,胞体呈圆形,其他血细胞悬浮.培养3 d,贴壁细胞逐渐变梭形;培养第4 d,细胞开始分裂;随着细胞数目的 增加,逐渐形成漩涡状排列,细胞形态呈梭形、三角形、多边形、不规则形;培养第10 d,贴壁细胞长满瓶底的80%,按1∶2传代.选择第3代骨髓干细胞分析显示,CD29、CD44、CD90阳性表达,CD31、CD34、CD45阴性表达.细胞成脂成骨诱导后染色鉴定呈阳性.结论 采用全骨髓法培养可获得生长状态良好,增殖能力强的骨髓间充质干细胞,方法简便、实用.
目的 分離培養鑒定小鼠的骨髓間充質榦細胞,觀察體外培養生長特性,併在特定條件下誘導分化,探討其成脂成骨分化能力.方法 採用全骨髓培養法培養小鼠骨髓間充質榦細胞,觀察榦細胞的形態和生長特性,用流式細胞儀對其細胞錶型CD29、CD90、CD34、CD44、CD31、CD45進行鑒定,成脂成骨誘導分化能力鑒定.結果 原代分離的細胞培養24 h,榦細胞開始貼壁,胞體呈圓形,其他血細胞懸浮.培養3 d,貼壁細胞逐漸變梭形;培養第4 d,細胞開始分裂;隨著細胞數目的 增加,逐漸形成漩渦狀排列,細胞形態呈梭形、三角形、多邊形、不規則形;培養第10 d,貼壁細胞長滿瓶底的80%,按1∶2傳代.選擇第3代骨髓榦細胞分析顯示,CD29、CD44、CD90暘性錶達,CD31、CD34、CD45陰性錶達.細胞成脂成骨誘導後染色鑒定呈暘性.結論 採用全骨髓法培養可穫得生長狀態良好,增殖能力彊的骨髓間充質榦細胞,方法簡便、實用.
목적 분리배양감정소서적골수간충질간세포,관찰체외배양생장특성,병재특정조건하유도분화,탐토기성지성골분화능력.방법 채용전골수배양법배양소서골수간충질간세포,관찰간세포적형태화생장특성,용류식세포의대기세포표형CD29、CD90、CD34、CD44、CD31、CD45진행감정,성지성골유도분화능력감정.결과 원대분리적세포배양24 h,간세포개시첩벽,포체정원형,기타혈세포현부.배양3 d,첩벽세포축점변사형;배양제4 d,세포개시분렬;수착세포수목적 증가,축점형성선와상배렬,세포형태정사형、삼각형、다변형、불규칙형;배양제10 d,첩벽세포장만병저적80%,안1∶2전대.선택제3대골수간세포분석현시,CD29、CD44、CD90양성표체,CD31、CD34、CD45음성표체.세포성지성골유도후염색감정정양성.결론 채용전골수법배양가획득생장상태량호,증식능력강적골수간충질간세포,방법간편、실용.