临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2013年
1期
28-31
,共4页
胰腺肿瘤%RNA干扰%甲基化转移酶1%前脑啡肽原%甲基化
胰腺腫瘤%RNA榦擾%甲基化轉移酶1%前腦啡肽原%甲基化
이선종류%RNA간우%갑기화전이매1%전뇌배태원%갑기화
目的 观察RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默DNMT1基因的表达对胰腺癌Panc-1细胞的前脑啡肽原(preproenkephalin,ppENK)基因甲基化状态的影响.方法 采用针对DNMT1的Stealth核糖核苷酸干扰(siRNA)胰腺癌细胞,观察DNMT1信使核糖核酸(mRNA)及DNMT1蛋白的表达;甲基化特异性PCR反应(MSP)检测不同处理组ppENK的甲基化状态.结果 Stealth RNAi转染到胰腺癌细胞Panc-1中48 h后,siRNA-3转染组的mRNA相对表达量和比率分别为0.116和32.9%,与空白对照组(0.352,100%)、脂质体对照组(0.346,98.2%)、RNAi阴性对照组(0.339,96.3%)相比差异有统计学意义(F=2.107 E4,P=0.000 1),转染组的mRNA相对抑制率为67.1%.siRNA-3转染组DNMT1蛋白相对表达量和比率分别为0.179和32.9%,与空白对照组(0.547,100%)、脂质体对照组(0.520,95%)、RNAi阴性对照组(0.535,97%)相比差异有统计学意义(F=2.195 E5,P=0.000 1).于100 bp和96 bp处可见ppENK基因特异性条带,呈现部分去甲基化状态的特点.结论 DNMT1靶向的Stealth RNA瞬时转染到胰腺癌细胞Panc-1中可明显沉默DNMT1的基因和蛋白的表达,逆转抑癌基因ppENK的高甲基化状态,为胰腺癌的基因治疗提供相关的理论依据.
目的 觀察RNA榦擾(RNA interference,RNAi)沉默DNMT1基因的錶達對胰腺癌Panc-1細胞的前腦啡肽原(preproenkephalin,ppENK)基因甲基化狀態的影響.方法 採用針對DNMT1的Stealth覈糖覈苷痠榦擾(siRNA)胰腺癌細胞,觀察DNMT1信使覈糖覈痠(mRNA)及DNMT1蛋白的錶達;甲基化特異性PCR反應(MSP)檢測不同處理組ppENK的甲基化狀態.結果 Stealth RNAi轉染到胰腺癌細胞Panc-1中48 h後,siRNA-3轉染組的mRNA相對錶達量和比率分彆為0.116和32.9%,與空白對照組(0.352,100%)、脂質體對照組(0.346,98.2%)、RNAi陰性對照組(0.339,96.3%)相比差異有統計學意義(F=2.107 E4,P=0.000 1),轉染組的mRNA相對抑製率為67.1%.siRNA-3轉染組DNMT1蛋白相對錶達量和比率分彆為0.179和32.9%,與空白對照組(0.547,100%)、脂質體對照組(0.520,95%)、RNAi陰性對照組(0.535,97%)相比差異有統計學意義(F=2.195 E5,P=0.000 1).于100 bp和96 bp處可見ppENK基因特異性條帶,呈現部分去甲基化狀態的特點.結論 DNMT1靶嚮的Stealth RNA瞬時轉染到胰腺癌細胞Panc-1中可明顯沉默DNMT1的基因和蛋白的錶達,逆轉抑癌基因ppENK的高甲基化狀態,為胰腺癌的基因治療提供相關的理論依據.
목적 관찰RNA간우(RNA interference,RNAi)침묵DNMT1기인적표체대이선암Panc-1세포적전뇌배태원(preproenkephalin,ppENK)기인갑기화상태적영향.방법 채용침대DNMT1적Stealth핵당핵감산간우(siRNA)이선암세포,관찰DNMT1신사핵당핵산(mRNA)급DNMT1단백적표체;갑기화특이성PCR반응(MSP)검측불동처리조ppENK적갑기화상태.결과 Stealth RNAi전염도이선암세포Panc-1중48 h후,siRNA-3전염조적mRNA상대표체량화비솔분별위0.116화32.9%,여공백대조조(0.352,100%)、지질체대조조(0.346,98.2%)、RNAi음성대조조(0.339,96.3%)상비차이유통계학의의(F=2.107 E4,P=0.000 1),전염조적mRNA상대억제솔위67.1%.siRNA-3전염조DNMT1단백상대표체량화비솔분별위0.179화32.9%,여공백대조조(0.547,100%)、지질체대조조(0.520,95%)、RNAi음성대조조(0.535,97%)상비차이유통계학의의(F=2.195 E5,P=0.000 1).우100 bp화96 bp처가견ppENK기인특이성조대,정현부분거갑기화상태적특점.결론 DNMT1파향적Stealth RNA순시전염도이선암세포Panc-1중가명현침묵DNMT1적기인화단백적표체,역전억암기인ppENK적고갑기화상태,위이선암적기인치료제공상관적이론의거.
