神经损伤与功能重建
神經損傷與功能重建
신경손상여공능중건
NEURAL INJURY AND FUNCTIONAL RECONSTRUCTION
2013年
1期
1-6
,共6页
李志军%何丽琳%易陈菊%唐娜
李誌軍%何麗琳%易陳菊%唐娜
리지군%하려림%역진국%당나
成年神经发生%NMDA受体NR2B亚型%Cre-loxp重组酶系统%条件性基因敲除
成年神經髮生%NMDA受體NR2B亞型%Cre-loxp重組酶繫統%條件性基因敲除
성년신경발생%NMDA수체NR2B아형%Cre-loxp중조매계통%조건성기인고제
目的:建立成年神经发生中新生颗粒细胞N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体NR2B亚型基因条件性敲除模型.方法:运用逆转录病毒基因标记技术,结合Cre-loxp重组酶系统,在ROSA26-LacZ基因报告小鼠体内研究逆转录病毒RSV-pGFP:T2aCre的Cre酶重组的发生以及其转化效率.在NR2Bf1/f1转基因小鼠中建立成年新生颗粒细胞NR2B基因敲除模型.结果:在逆转录病毒注射后14 d,观察到LacZ标记的神经元及β-gal和Cre免疫荧光双标阳性细胞,在海马齿状回颗粒下层、颗粒层以及hilus区表达;同时在嗅球颗粒层也可见Lacz表达.28 dCre转化效率高达98.3%.在NR2Bf1/f1转基因小鼠,14 d时分别在嗅球和齿状回的颗粒细胞层,观察到GFP和Cre同时标记的阳性新生颗粒细胞.结论:成年神经发生中起源于海马齿状回颗粒下层和侧脑室旁脑室管膜下区的新生颗粒细胞NR2B基因敲除模型建立.
目的:建立成年神經髮生中新生顆粒細胞N-甲基-D-天鼕氨痠(NMDA)受體NR2B亞型基因條件性敲除模型.方法:運用逆轉錄病毒基因標記技術,結閤Cre-loxp重組酶繫統,在ROSA26-LacZ基因報告小鼠體內研究逆轉錄病毒RSV-pGFP:T2aCre的Cre酶重組的髮生以及其轉化效率.在NR2Bf1/f1轉基因小鼠中建立成年新生顆粒細胞NR2B基因敲除模型.結果:在逆轉錄病毒註射後14 d,觀察到LacZ標記的神經元及β-gal和Cre免疫熒光雙標暘性細胞,在海馬齒狀迴顆粒下層、顆粒層以及hilus區錶達;同時在嗅毬顆粒層也可見Lacz錶達.28 dCre轉化效率高達98.3%.在NR2Bf1/f1轉基因小鼠,14 d時分彆在嗅毬和齒狀迴的顆粒細胞層,觀察到GFP和Cre同時標記的暘性新生顆粒細胞.結論:成年神經髮生中起源于海馬齒狀迴顆粒下層和側腦室徬腦室管膜下區的新生顆粒細胞NR2B基因敲除模型建立.
목적:건립성년신경발생중신생과립세포N-갑기-D-천동안산(NMDA)수체NR2B아형기인조건성고제모형.방법:운용역전록병독기인표기기술,결합Cre-loxp중조매계통,재ROSA26-LacZ기인보고소서체내연구역전록병독RSV-pGFP:T2aCre적Cre매중조적발생이급기전화효솔.재NR2Bf1/f1전기인소서중건립성년신생과립세포NR2B기인고제모형.결과:재역전록병독주사후14 d,관찰도LacZ표기적신경원급β-gal화Cre면역형광쌍표양성세포,재해마치상회과립하층、과립층이급hilus구표체;동시재후구과립층야가견Lacz표체.28 dCre전화효솔고체98.3%.재NR2Bf1/f1전기인소서,14 d시분별재후구화치상회적과립세포층,관찰도GFP화Cre동시표기적양성신생과립세포.결론:성년신경발생중기원우해마치상회과립하층화측뇌실방뇌실관막하구적신생과립세포NR2B기인고제모형건립.
