东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2013年
2期
135-140
,共6页
刘建娥%沈宇清%李明莉%吴晓箐%史茜%张建琼
劉建娥%瀋宇清%李明莉%吳曉箐%史茜%張建瓊
류건아%침우청%리명리%오효정%사천%장건경
中枢神经系统%经典H-2%原位杂交%探针%小鼠
中樞神經繫統%經典H-2%原位雜交%探針%小鼠
중추신경계통%경전H-2%원위잡교%탐침%소서
目的:研究经典H-2基因在C57小鼠中枢神经系统中的表达谱,设计合成地高辛标记的经典H-2 mRNA探针.方法:利用PCR扩增出针对经典H-2分子的特异性保守片段,然后将PCR产物纯化后与pGEM-T Easy载体连接,转化到大肠杆菌DH5α中.测序后获得目的基因的单克隆,扩增并提取质粒,采用体外转录的方法合成地高辛标记的经典H-2 mRNA的正、反义RNA探针.运用原位杂交方法分析经典H-2基因在C57小鼠中枢神经系统中的表达情况.结果:成功构建了321 bp经典H-2 mRNA的正、反义探针,原位杂交方法检测到经典H-2 mRNA在出生后15 d小鼠中枢神经系统中反义探针有杂交信号,正义探针无杂交信号.结论:正义探针无杂交信号表明合成的321 bp经典H-2 mRNA反义探针具有特异性.
目的:研究經典H-2基因在C57小鼠中樞神經繫統中的錶達譜,設計閤成地高辛標記的經典H-2 mRNA探針.方法:利用PCR擴增齣針對經典H-2分子的特異性保守片段,然後將PCR產物純化後與pGEM-T Easy載體連接,轉化到大腸桿菌DH5α中.測序後穫得目的基因的單剋隆,擴增併提取質粒,採用體外轉錄的方法閤成地高辛標記的經典H-2 mRNA的正、反義RNA探針.運用原位雜交方法分析經典H-2基因在C57小鼠中樞神經繫統中的錶達情況.結果:成功構建瞭321 bp經典H-2 mRNA的正、反義探針,原位雜交方法檢測到經典H-2 mRNA在齣生後15 d小鼠中樞神經繫統中反義探針有雜交信號,正義探針無雜交信號.結論:正義探針無雜交信號錶明閤成的321 bp經典H-2 mRNA反義探針具有特異性.
목적:연구경전H-2기인재C57소서중추신경계통중적표체보,설계합성지고신표기적경전H-2 mRNA탐침.방법:이용PCR확증출침대경전H-2분자적특이성보수편단,연후장PCR산물순화후여pGEM-T Easy재체련접,전화도대장간균DH5α중.측서후획득목적기인적단극륭,확증병제취질립,채용체외전록적방법합성지고신표기적경전H-2 mRNA적정、반의RNA탐침.운용원위잡교방법분석경전H-2기인재C57소서중추신경계통중적표체정황.결과:성공구건료321 bp경전H-2 mRNA적정、반의탐침,원위잡교방법검측도경전H-2 mRNA재출생후15 d소서중추신경계통중반의탐침유잡교신호,정의탐침무잡교신호.결론:정의탐침무잡교신호표명합성적321 bp경전H-2 mRNA반의탐침구유특이성.
