广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
2期
169-172
,共4页
于晓春%罗时敏%黄昭%刘继云
于曉春%囉時敏%黃昭%劉繼雲
우효춘%라시민%황소%류계운
细胞因子信号传导抑制因子-1%树突状细胞%腺病毒载体
細胞因子信號傳導抑製因子-1%樹突狀細胞%腺病毒載體
세포인자신호전도억제인자-1%수돌상세포%선병독재체
目的 探讨细胞因子信号传导抑制因子-1(SOCS1)基因腺病毒转染对未成熟的树突状细胞(DC)的成熟及细胞因子分泌功能的影响.方法 构建SOCS1腺病毒并PCR鉴定,感染体外分离、培养的小鼠骨髓DC(阳性转染组),Western blot法检测SOCS1的表达,以阴性转染组(转染Ad-GFP)及空白对照组(未经病毒转染)为对照,采用脂多糖(LPS)刺激诱导各组DC成熟,通过流式细胞术测定LPS刺激前后各组DC表面CD40及CD80的表达水平,ELISA法检测细胞因子白细胞介素(IL)-10及IL-12的分泌水平.结果 成功构建并鉴定转染腺病毒,感染DC后,阳性转染组SOCS1蛋白表达水平较阴性转染组及空白对照组显著增高.LPS刺激后,阳性转染组CD40及CD80的表达较阴性转染组及空白对照组显著降低(P<0.05),IL-12分泌水平明显较低(P<0.05),而IL-10分泌水平显著增高(P<0.05).结论 通过腺病毒转染使SOCS1在DC中过度表达,不仅能有效抑制DC的成熟,还能抑制LPS介导的DC分泌细胞因子IL-12,并诱导抑制性细胞因子IL-10的分泌.
目的 探討細胞因子信號傳導抑製因子-1(SOCS1)基因腺病毒轉染對未成熟的樹突狀細胞(DC)的成熟及細胞因子分泌功能的影響.方法 構建SOCS1腺病毒併PCR鑒定,感染體外分離、培養的小鼠骨髓DC(暘性轉染組),Western blot法檢測SOCS1的錶達,以陰性轉染組(轉染Ad-GFP)及空白對照組(未經病毒轉染)為對照,採用脂多糖(LPS)刺激誘導各組DC成熟,通過流式細胞術測定LPS刺激前後各組DC錶麵CD40及CD80的錶達水平,ELISA法檢測細胞因子白細胞介素(IL)-10及IL-12的分泌水平.結果 成功構建併鑒定轉染腺病毒,感染DC後,暘性轉染組SOCS1蛋白錶達水平較陰性轉染組及空白對照組顯著增高.LPS刺激後,暘性轉染組CD40及CD80的錶達較陰性轉染組及空白對照組顯著降低(P<0.05),IL-12分泌水平明顯較低(P<0.05),而IL-10分泌水平顯著增高(P<0.05).結論 通過腺病毒轉染使SOCS1在DC中過度錶達,不僅能有效抑製DC的成熟,還能抑製LPS介導的DC分泌細胞因子IL-12,併誘導抑製性細胞因子IL-10的分泌.
목적 탐토세포인자신호전도억제인자-1(SOCS1)기인선병독전염대미성숙적수돌상세포(DC)적성숙급세포인자분비공능적영향.방법 구건SOCS1선병독병PCR감정,감염체외분리、배양적소서골수DC(양성전염조),Western blot법검측SOCS1적표체,이음성전염조(전염Ad-GFP)급공백대조조(미경병독전염)위대조,채용지다당(LPS)자격유도각조DC성숙,통과류식세포술측정LPS자격전후각조DC표면CD40급CD80적표체수평,ELISA법검측세포인자백세포개소(IL)-10급IL-12적분비수평.결과 성공구건병감정전염선병독,감염DC후,양성전염조SOCS1단백표체수평교음성전염조급공백대조조현저증고.LPS자격후,양성전염조CD40급CD80적표체교음성전염조급공백대조조현저강저(P<0.05),IL-12분비수평명현교저(P<0.05),이IL-10분비수평현저증고(P<0.05).결론 통과선병독전염사SOCS1재DC중과도표체,불부능유효억제DC적성숙,환능억제LPS개도적DC분비세포인자IL-12,병유도억제성세포인자IL-10적분비.