国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2013年
4期
390-392
,共3页
韩飞%杨致邦%王长本%李建英%周政%牟君成
韓飛%楊緻邦%王長本%李建英%週政%牟君成
한비%양치방%왕장본%리건영%주정%모군성
螺杆菌,幽门%黏附素%HP1188蛋白%蛋黄抗体%体外试验
螺桿菌,幽門%黏附素%HP1188蛋白%蛋黃抗體%體外試驗
라간균,유문%점부소%HP1188단백%단황항체%체외시험
目的 制备抗幽门螺杆菌(H.pylori) HP1188 蛋黄抗体(immunoglobulin yolk,IgY),即 HP1188-IgY,了解其理化特性和生物学活性,为研制H.pylori HP1188-IgY型抗体口服制剂提供实验依据.方法 用纯化的重组HP1188蛋白免疫产蛋鸡,以水稀释法结合氯仿有机沉淀法提取蛋黄抗体(HP1188-IgY),采用SDS-PAGE电泳检测其纯度,Bradford法测定蛋白含量,Western blot分析抗原特异性.间接ELISA评价 HP1188-IgY 对热、酸及胃蛋白酶消化作用的耐受情况.分别检测不同浓度 HP1188-IgY及不同 pH 相同浓度HP1188-IgY对H.pylori的生长抑制试验.用MTT法检测不同浓度HP1188-IgY对H.pylori细胞毒活性的中和作用.结果 HP1188-IgY 纯度约为68%,蛋白浓度为7.79 mg/mL,Western blot结果 显示在相对分子质量30 000附近出现反应条带.HP1188-IgY具有一定的耐热性、耐酸性和耐胃蛋白酶消化的能力.HP1188-IgY在体外可抑制H.pylori生长,并具有浓度依赖性和pH依赖性.HP1188-IgY 能阻断H.pylori菌体蛋白对Hela细胞的毒性作用,且该作用具有浓度依赖性.结论 成功制备了HP1188-IgY,其具有良好的理化性质和生物学特性,为进一步制备预防幽门螺杆菌感染的口服制剂奠定了基础.
目的 製備抗幽門螺桿菌(H.pylori) HP1188 蛋黃抗體(immunoglobulin yolk,IgY),即 HP1188-IgY,瞭解其理化特性和生物學活性,為研製H.pylori HP1188-IgY型抗體口服製劑提供實驗依據.方法 用純化的重組HP1188蛋白免疫產蛋鷄,以水稀釋法結閤氯倣有機沉澱法提取蛋黃抗體(HP1188-IgY),採用SDS-PAGE電泳檢測其純度,Bradford法測定蛋白含量,Western blot分析抗原特異性.間接ELISA評價 HP1188-IgY 對熱、痠及胃蛋白酶消化作用的耐受情況.分彆檢測不同濃度 HP1188-IgY及不同 pH 相同濃度HP1188-IgY對H.pylori的生長抑製試驗.用MTT法檢測不同濃度HP1188-IgY對H.pylori細胞毒活性的中和作用.結果 HP1188-IgY 純度約為68%,蛋白濃度為7.79 mg/mL,Western blot結果 顯示在相對分子質量30 000附近齣現反應條帶.HP1188-IgY具有一定的耐熱性、耐痠性和耐胃蛋白酶消化的能力.HP1188-IgY在體外可抑製H.pylori生長,併具有濃度依賴性和pH依賴性.HP1188-IgY 能阻斷H.pylori菌體蛋白對Hela細胞的毒性作用,且該作用具有濃度依賴性.結論 成功製備瞭HP1188-IgY,其具有良好的理化性質和生物學特性,為進一步製備預防幽門螺桿菌感染的口服製劑奠定瞭基礎.
목적 제비항유문라간균(H.pylori) HP1188 단황항체(immunoglobulin yolk,IgY),즉 HP1188-IgY,료해기이화특성화생물학활성,위연제H.pylori HP1188-IgY형항체구복제제제공실험의거.방법 용순화적중조HP1188단백면역산단계,이수희석법결합록방유궤침정법제취단황항체(HP1188-IgY),채용SDS-PAGE전영검측기순도,Bradford법측정단백함량,Western blot분석항원특이성.간접ELISA평개 HP1188-IgY 대열、산급위단백매소화작용적내수정황.분별검측불동농도 HP1188-IgY급불동 pH 상동농도HP1188-IgY대H.pylori적생장억제시험.용MTT법검측불동농도HP1188-IgY대H.pylori세포독활성적중화작용.결과 HP1188-IgY 순도약위68%,단백농도위7.79 mg/mL,Western blot결과 현시재상대분자질량30 000부근출현반응조대.HP1188-IgY구유일정적내열성、내산성화내위단백매소화적능력.HP1188-IgY재체외가억제H.pylori생장,병구유농도의뢰성화pH의뢰성.HP1188-IgY 능조단H.pylori균체단백대Hela세포적독성작용,차해작용구유농도의뢰성.결론 성공제비료HP1188-IgY,기구유량호적이화성질화생물학특성,위진일보제비예방유문라간균감염적구복제제전정료기출.