CAJ | 학술논문

目的确定成体西藏小型猪胰岛细胞体外分离、纯化的理想条件,为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛细胞.方法对比不同质量浓度的胶原酶(1 mg/ml,2 mg/ml,3 mg/ml,4 mg/ml)和同一质量浓度不同时间点(0 min,15 min,30 min,45 min,60 min,75 min,90 min)分离获得胰岛细胞的数量和效果;使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心和静置4种方法纯化胰岛细胞悬液,比较最终收集到的胰岛细胞数量和效果；用DTZ染色计算胰岛细胞的纯度；用AO/PI染色计算胰岛细胞存活率.结果确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛细胞的最佳时间,胶原酶l mg/ml和2 mg/ml组为45 min,3 mg/ml和4 mg/ml组为30 min,各组在最佳时间点获得胰岛细胞的数量最多的为1 mg/ml组,胰岛细胞形态完整；4种纯化方法中,收集的胰岛细胞数量由多到少依次为静置组＞ Ficoll400密度梯度离心组＞离心组＞淋巴分离液离心组.经AO/PI染色后检测胰岛细胞的存活率为95.00％以上.结论在组织块剪碎消化的情况下,胶原酶质量浓度1 mg/ml、消化时间45 min的分离条件可获得数量较多的胰岛细胞,Ficoll400密度梯度离心的纯化手段收集到的胰岛细胞效果最好.
목적 학정성체서장소형저이도세포체외분리、순화적이상조건,위이충이식치료당뇨병제공고질량적이도세포.방법 대비불동질량농도적효원매(1 mg/ml,2 mg/ml,3 mg/ml,4 mg/ml)화동일질량농도불동시간점(0 min,15 min,30 min,45 min,60 min,75 min,90 min)분리획득이도세포적수량화효과;사용Ficoll400밀도제도리심、림파분리액분리、리심화정치4충방법순화이도세포현액,비교최종수집도적이도세포수량화효과；용DTZ염색계산이도세포적순도；용AO/PI염색계산이도세포존활솔.결과 학정료불동질량농도적효원매획취이도세포적최가시간,효원매l mg/ml화2 mg/ml조위45 min,3 mg/ml화4 mg/ml조위30 min,각조재최가시간점획득이도세포적수량최다적위1 mg/ml조,이도세포형태완정；4충순화방법중,수집적이도세포수량유다도소의차위정치조＞ Ficoll400밀도제도리심조＞리심조＞림파분리액리심조.경AO/PI염색후검측이도세포적존활솔위95.00％이상.결론 재조직괴전쇄소화적정황하,효원매질량농도1 mg/ml、소화시간45 min적분리조건가획득수량교다적이도세포,Ficoll400밀도제도리심적순화수단수집도적이도세포효과최호.