首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2013年
2期
224-231
,共8页
毛婷%王跃秀%刘杰%李晶%王军
毛婷%王躍秀%劉傑%李晶%王軍
모정%왕약수%류걸%리정%왕군
西地那非%电压依赖性钾通道%人肺动脉平滑肌细胞
西地那非%電壓依賴性鉀通道%人肺動脈平滑肌細胞
서지나비%전압의뢰성갑통도%인폐동맥평활기세포
目的 探讨西地那非对低氧下调人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASM Cs)电压依赖性钾通道(voltage-dependent potassium channels,Kv)的干预作用.方法 应用膜片钳技术记录PASMCs K+电流；观察低氧刺激前后钾离子(K+)电流的变化以及西地那非(sildenafil)的干预作用；通过特异性Kv1.5抗体透析,分析西地那非作用于人PASMCs Kv分子靶点即通道亚单位；运用Real-time PCR及Western blotting技术检测低氧刺激前后及西地那非对人PASMCs上的Kv1.5通道基因转录水平和蛋白表达水平的影响.结果 低氧明显抑制了人PASMCs细胞膜上的全细胞K+电流；而西地那非则可以对抗低氧对全细胞K+电流的抑制作用；而且西地那非对低氧下人PASMCs Kv的调控作用靶点主要是Kv1.5；同时西地那非部分恢复了低氧抑制的细胞上的Kv1.5 mRNA和蛋白表达.结论 西地那非能够抑制低氧对人肺动脉平滑肌细胞电压依赖性钾通道功能与表达的下调作用.
目的 探討西地那非對低氧下調人肺動脈平滑肌細胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASM Cs)電壓依賴性鉀通道(voltage-dependent potassium channels,Kv)的榦預作用.方法 應用膜片鉗技術記錄PASMCs K+電流；觀察低氧刺激前後鉀離子(K+)電流的變化以及西地那非(sildenafil)的榦預作用；通過特異性Kv1.5抗體透析,分析西地那非作用于人PASMCs Kv分子靶點即通道亞單位；運用Real-time PCR及Western blotting技術檢測低氧刺激前後及西地那非對人PASMCs上的Kv1.5通道基因轉錄水平和蛋白錶達水平的影響.結果 低氧明顯抑製瞭人PASMCs細胞膜上的全細胞K+電流；而西地那非則可以對抗低氧對全細胞K+電流的抑製作用；而且西地那非對低氧下人PASMCs Kv的調控作用靶點主要是Kv1.5；同時西地那非部分恢複瞭低氧抑製的細胞上的Kv1.5 mRNA和蛋白錶達.結論 西地那非能夠抑製低氧對人肺動脈平滑肌細胞電壓依賴性鉀通道功能與錶達的下調作用.
목적 탐토서지나비대저양하조인폐동맥평활기세포(pulmonary artery smooth muscle cells,PASM Cs)전압의뢰성갑통도(voltage-dependent potassium channels,Kv)적간예작용.방법 응용막편겸기술기록PASMCs K+전류；관찰저양자격전후갑리자(K+)전류적변화이급서지나비(sildenafil)적간예작용；통과특이성Kv1.5항체투석,분석서지나비작용우인PASMCs Kv분자파점즉통도아단위；운용Real-time PCR급Western blotting기술검측저양자격전후급서지나비대인PASMCs상적Kv1.5통도기인전록수평화단백표체수평적영향.결과 저양명현억제료인PASMCs세포막상적전세포K+전류；이서지나비칙가이대항저양대전세포K+전류적억제작용；이차서지나비대저양하인PASMCs Kv적조공작용파점주요시Kv1.5；동시서지나비부분회복료저양억제적세포상적Kv1.5 mRNA화단백표체.결론 서지나비능구억제저양대인폐동맥평활기세포전압의뢰성갑통도공능여표체적하조작용.
