西安交通大学学报(医学版)
西安交通大學學報(醫學版)
서안교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
3期
313-319
,共7页
季政%郭航远%池菊芳%刘龙斌%唐伟良%许富康%翟小亚%孙荷%茹翱
季政%郭航遠%池菊芳%劉龍斌%唐偉良%許富康%翟小亞%孫荷%茹翱
계정%곽항원%지국방%류룡빈%당위량%허부강%적소아%손하%여고
黄酒%红葡萄酒%动脉粥样硬化%内皮细胞%基质金属蛋白酶-2%同型半胱氨酸
黃酒%紅葡萄酒%動脈粥樣硬化%內皮細胞%基質金屬蛋白酶-2%同型半胱氨痠
황주%홍포도주%동맥죽양경화%내피세포%기질금속단백매-2%동형반광안산
目的 观察黄酒能否抑制同型半胱氨酸(Hcy)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达及探讨其可能机制.方法 大鼠原代主动脉VECs经分离培养及纯化鉴定后,取第3~4代细胞用于实验.将Hcy(0、50、100、500、1 000μmol/L)与VECs共同孵育48 h及100μmol/L Hcy与VECs共同培养24、48、72h,分别用荧光定量PCR(FQ-PCR)和免疫印迹法检测Hcy对VECs中MMP-2 mRNA和蛋白表达的影响,确定Hcy最佳的刺激浓度和时间.每种酒(10、12、14、1 6、18、20 mL/L)与100μmol/L Hcy共同孵育VECs 48 h,MTT法检测酒类对细胞活性的影响,确定最佳干预浓度后处理分为正常组、Hcy组、Hcy+黄酒组、Hcy+红葡萄酒组、Hcy+酒精组5组.培养48 h后收集样品,FQ-PCR检测VECs中MMP-2mRNA水平,免疫印迹法测定VECs中MMP-2的表达量.结果 在50~1 000 μmol/L浓度范围内与对照组相比Hcy能明显地增强MMP-2 mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),至500 μm.l/L时开始达到最高.Hcy(100 μmol/L)刺激24、48、72h后MMP-2 mRNA和蛋白表达较对照组有明显的增强(均P<0.01),48h后开始达到最大值.实验组与Hcy组相比,黄酒组和红酒组MMP-2 mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.01).酒精组MMP-2 mRNA和蛋白表达下降,差异均无统计学意义(P>0.05).与酒精组相比,黄酒组和红酒组VECs中MMP-2 mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.01),黄酒组和红酒组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 Hcy能增强VECs中MMP 2 mRNA和蛋白的表达,这可能在动脉粥样硬化的发病机制中发挥重要作用.黄酒和红葡萄酒能抑制Hcy对MMP-2 mRNA和蛋白表达的增强,这可能是它们抗动脉粥样硬化和心血管保护作用的机制之一.
目的 觀察黃酒能否抑製同型半胱氨痠(Hcy)誘導的大鼠血管內皮細胞(vascular endothelial cells,VECs)中基質金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)錶達及探討其可能機製.方法 大鼠原代主動脈VECs經分離培養及純化鑒定後,取第3~4代細胞用于實驗.將Hcy(0、50、100、500、1 000μmol/L)與VECs共同孵育48 h及100μmol/L Hcy與VECs共同培養24、48、72h,分彆用熒光定量PCR(FQ-PCR)和免疫印跡法檢測Hcy對VECs中MMP-2 mRNA和蛋白錶達的影響,確定Hcy最佳的刺激濃度和時間.每種酒(10、12、14、1 6、18、20 mL/L)與100μmol/L Hcy共同孵育VECs 48 h,MTT法檢測酒類對細胞活性的影響,確定最佳榦預濃度後處理分為正常組、Hcy組、Hcy+黃酒組、Hcy+紅葡萄酒組、Hcy+酒精組5組.培養48 h後收集樣品,FQ-PCR檢測VECs中MMP-2mRNA水平,免疫印跡法測定VECs中MMP-2的錶達量.結果 在50~1 000 μmol/L濃度範圍內與對照組相比Hcy能明顯地增彊MMP-2 mRNA和蛋白錶達(P<0.05或P<0.01),至500 μm.l/L時開始達到最高.Hcy(100 μmol/L)刺激24、48、72h後MMP-2 mRNA和蛋白錶達較對照組有明顯的增彊(均P<0.01),48h後開始達到最大值.實驗組與Hcy組相比,黃酒組和紅酒組MMP-2 mRNA和蛋白錶達均明顯下降,差異有統計學意義(均P<0.01).酒精組MMP-2 mRNA和蛋白錶達下降,差異均無統計學意義(P>0.05).與酒精組相比,黃酒組和紅酒組VECs中MMP-2 mRNA和蛋白錶達均明顯下降,差異有統計學意義(均P<0.01),黃酒組和紅酒組之間差異無統計學意義(P>0.05).結論 Hcy能增彊VECs中MMP 2 mRNA和蛋白的錶達,這可能在動脈粥樣硬化的髮病機製中髮揮重要作用.黃酒和紅葡萄酒能抑製Hcy對MMP-2 mRNA和蛋白錶達的增彊,這可能是它們抗動脈粥樣硬化和心血管保護作用的機製之一.
목적 관찰황주능부억제동형반광안산(Hcy)유도적대서혈관내피세포(vascular endothelial cells,VECs)중기질금속단백매-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)표체급탐토기가능궤제.방법 대서원대주동맥VECs경분리배양급순화감정후,취제3~4대세포용우실험.장Hcy(0、50、100、500、1 000μmol/L)여VECs공동부육48 h급100μmol/L Hcy여VECs공동배양24、48、72h,분별용형광정량PCR(FQ-PCR)화면역인적법검측Hcy대VECs중MMP-2 mRNA화단백표체적영향,학정Hcy최가적자격농도화시간.매충주(10、12、14、1 6、18、20 mL/L)여100μmol/L Hcy공동부육VECs 48 h,MTT법검측주류대세포활성적영향,학정최가간예농도후처리분위정상조、Hcy조、Hcy+황주조、Hcy+홍포도주조、Hcy+주정조5조.배양48 h후수집양품,FQ-PCR검측VECs중MMP-2mRNA수평,면역인적법측정VECs중MMP-2적표체량.결과 재50~1 000 μmol/L농도범위내여대조조상비Hcy능명현지증강MMP-2 mRNA화단백표체(P<0.05혹P<0.01),지500 μm.l/L시개시체도최고.Hcy(100 μmol/L)자격24、48、72h후MMP-2 mRNA화단백표체교대조조유명현적증강(균P<0.01),48h후개시체도최대치.실험조여Hcy조상비,황주조화홍주조MMP-2 mRNA화단백표체균명현하강,차이유통계학의의(균P<0.01).주정조MMP-2 mRNA화단백표체하강,차이균무통계학의의(P>0.05).여주정조상비,황주조화홍주조VECs중MMP-2 mRNA화단백표체균명현하강,차이유통계학의의(균P<0.01),황주조화홍주조지간차이무통계학의의(P>0.05).결론 Hcy능증강VECs중MMP 2 mRNA화단백적표체,저가능재동맥죽양경화적발병궤제중발휘중요작용.황주화홍포도주능억제Hcy대MMP-2 mRNA화단백표체적증강,저가능시타문항동맥죽양경화화심혈관보호작용적궤제지일.