中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
4期
55-58
,共4页
禽传染性贫血病病毒%套式PCR%检测
禽傳染性貧血病病毒%套式PCR%檢測
금전염성빈혈병병독%투식PCR%검측
本试验根据GenBank中登录的禽传染性贫血病毒(CAV)基因序列,设计合成2对引物,外引物的扩增片段大小为485 bp,内引物的扩增片段大小为297 bp,建立了适合CAV快速检测的套式PCR方法(nested PCR),并采用该方法对CAV阳性毒株及临床病料进行了检测.结果显示,该方法能扩增到297 bp的条带,禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽网状内皮增生病病毒、减蛋综合征病毒、禽呼肠孤病毒、马立克氏病病毒的扩增结果均为阴性.该方法第1步扩增的敏感性是100 pg,第2步PCR扩增的敏感性是1 fg,敏感性提高了10 5倍.本研究建立的CAV套式PCR方法具有敏感性高、重复性好、特异性强等优点,可用于CAV的临床诊断和分子流行病学调查等.
本試驗根據GenBank中登錄的禽傳染性貧血病毒(CAV)基因序列,設計閤成2對引物,外引物的擴增片段大小為485 bp,內引物的擴增片段大小為297 bp,建立瞭適閤CAV快速檢測的套式PCR方法(nested PCR),併採用該方法對CAV暘性毒株及臨床病料進行瞭檢測.結果顯示,該方法能擴增到297 bp的條帶,禽流感病毒(H9亞型)、新城疫病毒、傳染性法氏囊病病毒、禽網狀內皮增生病病毒、減蛋綜閤徵病毒、禽呼腸孤病毒、馬立剋氏病病毒的擴增結果均為陰性.該方法第1步擴增的敏感性是100 pg,第2步PCR擴增的敏感性是1 fg,敏感性提高瞭10 5倍.本研究建立的CAV套式PCR方法具有敏感性高、重複性好、特異性彊等優點,可用于CAV的臨床診斷和分子流行病學調查等.
본시험근거GenBank중등록적금전염성빈혈병독(CAV)기인서렬,설계합성2대인물,외인물적확증편단대소위485 bp,내인물적확증편단대소위297 bp,건립료괄합CAV쾌속검측적투식PCR방법(nested PCR),병채용해방법대CAV양성독주급림상병료진행료검측.결과현시,해방법능확증도297 bp적조대,금류감병독(H9아형)、신성역병독、전염성법씨낭병병독、금망상내피증생병병독、감단종합정병독、금호장고병독、마립극씨병병독적확증결과균위음성.해방법제1보확증적민감성시100 pg,제2보PCR확증적민감성시1 fg,민감성제고료10 5배.본연구건립적CAV투식PCR방법구유민감성고、중복성호、특이성강등우점,가용우CAV적림상진단화분자류행병학조사등.
