世界热带农业信息
世界熱帶農業信息
세계열대농업신식
WORLD TROPICAL AGRICULTURE INFORMATION
2013年
4期
1-4
,共4页
P.Venkatachalam%田朗
P.Venkatachalam%田朗
P.Venkatachalam%전랑
橡胶树%克隆%DNA扩增%聚合酶链式反应%RAPD标记
橡膠樹%剋隆%DNA擴增%聚閤酶鏈式反應%RAPD標記
상효수%극륭%DNA확증%취합매련식반응%RAPD표기
橡胶树(Hevea brasiliensis Muell.Arg.)的传统种植区主要分布于高温多雨的热带地区,抗旱基因或DNA标记的筛选鉴定对于橡胶耐旱品系的选育及橡胶树向温光和雨量相对不足的非传统植胶区的拓展具有十分重要的意义.RAPD分析是目前遗传多态性研究及特异性基因片段鉴定最有效的分子学工具之一.本研究借助聚合酶链式反应(PCR)对来自37个橡胶无性系的基因组DNAs进行了RAPD分析.结果显示,多态性及特异性扩增条带的数量随无性系及引物的不同而有所差异,有些扩增带为一些无性系共有,而另一些则仅存在于个别或少数无性系之中.根据引物OPB-12的两个特异性扩增条带(1.2和1.4 kb)在各无性系中单独或同时存在与否,我们鉴定出了两个相应的特异性RAPD标记,其中1.4 kb扩增带尤其引人注目.克隆及测序结果表明,该RAPD片段与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)脯氨酸特异性通透酶基因存在一定程度同源性.针对该片段设计一对特异性引物并再次对基因组DNA进行更严格条件下的PCR扩增,结果从14个参试无性系中获得了该1.4kb条带.这种由RAPD标记通过特异性引物设计转化得到的SCAR(序列特异性扩增区)标记可用于橡胶树优良或特异性基因的筛选及鉴定.
橡膠樹(Hevea brasiliensis Muell.Arg.)的傳統種植區主要分佈于高溫多雨的熱帶地區,抗旱基因或DNA標記的篩選鑒定對于橡膠耐旱品繫的選育及橡膠樹嚮溫光和雨量相對不足的非傳統植膠區的拓展具有十分重要的意義.RAPD分析是目前遺傳多態性研究及特異性基因片段鑒定最有效的分子學工具之一.本研究藉助聚閤酶鏈式反應(PCR)對來自37箇橡膠無性繫的基因組DNAs進行瞭RAPD分析.結果顯示,多態性及特異性擴增條帶的數量隨無性繫及引物的不同而有所差異,有些擴增帶為一些無性繫共有,而另一些則僅存在于箇彆或少數無性繫之中.根據引物OPB-12的兩箇特異性擴增條帶(1.2和1.4 kb)在各無性繫中單獨或同時存在與否,我們鑒定齣瞭兩箇相應的特異性RAPD標記,其中1.4 kb擴增帶尤其引人註目.剋隆及測序結果錶明,該RAPD片段與釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)脯氨痠特異性通透酶基因存在一定程度同源性.針對該片段設計一對特異性引物併再次對基因組DNA進行更嚴格條件下的PCR擴增,結果從14箇參試無性繫中穫得瞭該1.4kb條帶.這種由RAPD標記通過特異性引物設計轉化得到的SCAR(序列特異性擴增區)標記可用于橡膠樹優良或特異性基因的篩選及鑒定.
상효수(Hevea brasiliensis Muell.Arg.)적전통충식구주요분포우고온다우적열대지구,항한기인혹DNA표기적사선감정대우상효내한품계적선육급상효수향온광화우량상대불족적비전통식효구적탁전구유십분중요적의의.RAPD분석시목전유전다태성연구급특이성기인편단감정최유효적분자학공구지일.본연구차조취합매련식반응(PCR)대래자37개상효무성계적기인조DNAs진행료RAPD분석.결과현시,다태성급특이성확증조대적수량수무성계급인물적불동이유소차이,유사확증대위일사무성계공유,이령일사칙부존재우개별혹소수무성계지중.근거인물OPB-12적량개특이성확증조대(1.2화1.4 kb)재각무성계중단독혹동시존재여부,아문감정출료량개상응적특이성RAPD표기,기중1.4 kb확증대우기인인주목.극륭급측서결과표명,해RAPD편단여양주효모(Saccharomyces cerevisiae)포안산특이성통투매기인존재일정정도동원성.침대해편단설계일대특이성인물병재차대기인조DNA진행경엄격조건하적PCR확증,결과종14개삼시무성계중획득료해1.4kb조대.저충유RAPD표기통과특이성인물설계전화득도적SCAR(서렬특이성확증구)표기가용우상효수우량혹특이성기인적사선급감정.
