临床合理用药杂志
臨床閤理用藥雜誌
림상합리용약잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL RATIONAL DRUG USE
2013年
15期
16-18
,共3页
金晶%马跃辉%詹仁雅%周永庆%俞建波
金晶%馬躍輝%詹仁雅%週永慶%俞建波
금정%마약휘%첨인아%주영경%유건파
受体,表皮生长因子%RNA干扰%慢病毒载体
受體,錶皮生長因子%RNA榦擾%慢病毒載體
수체,표피생장인자%RNA간우%만병독재체
目的 构建表皮生长因子受体(EGFR)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,为其体内外实验研究提供依据.方法 合成EGFR基因的miRNA干扰序列,构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-EGFR质粒,测序验证插入序列正确,连接到慢病毒载体pLenti6.3-MCS/V5 DEST中,获得pLenti6.3-EGFR-miRNA质粒,与慢病毒包装质粒Packaging MIX、POLOdelivererTM 3000 Transfection Reagent共转染293T细胞株,细胞包装产生慢病毒颗粒,测定慢病毒滴度.结果 PCR和测序结果证实,EGFR miRNA核苷酸链序列插入正确,包装慢病毒产生病毒悬液滴度为1.8×106 ifu/ml.结论 成功构建EGFR基因RNAi慢病毒载体,为研究其在胶质瘤细胞中的生物学功能奠定基础.
目的 構建錶皮生長因子受體(EGFR)基因RNA榦擾(RNAi)慢病毒載體,為其體內外實驗研究提供依據.方法 閤成EGFR基因的miRNA榦擾序列,構建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-EGFR質粒,測序驗證插入序列正確,連接到慢病毒載體pLenti6.3-MCS/V5 DEST中,穫得pLenti6.3-EGFR-miRNA質粒,與慢病毒包裝質粒Packaging MIX、POLOdelivererTM 3000 Transfection Reagent共轉染293T細胞株,細胞包裝產生慢病毒顆粒,測定慢病毒滴度.結果 PCR和測序結果證實,EGFR miRNA覈苷痠鏈序列插入正確,包裝慢病毒產生病毒懸液滴度為1.8×106 ifu/ml.結論 成功構建EGFR基因RNAi慢病毒載體,為研究其在膠質瘤細胞中的生物學功能奠定基礎.
목적 구건표피생장인자수체(EGFR)기인RNA간우(RNAi)만병독재체,위기체내외실험연구제공의거.방법 합성EGFR기인적miRNA간우서렬,구건pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-EGFR질립,측서험증삽입서렬정학,련접도만병독재체pLenti6.3-MCS/V5 DEST중,획득pLenti6.3-EGFR-miRNA질립,여만병독포장질립Packaging MIX、POLOdelivererTM 3000 Transfection Reagent공전염293T세포주,세포포장산생만병독과립,측정만병독적도.결과 PCR화측서결과증실,EGFR miRNA핵감산련서렬삽입정학,포장만병독산생병독현액적도위1.8×106 ifu/ml.결론 성공구건EGFR기인RNAi만병독재체,위연구기재효질류세포중적생물학공능전정기출.
