透析与人工器官
透析與人工器官
투석여인공기관
CHINESE JOURNAL OF DIALYSIS AND ARTIFICIAL ORGANS
2012年
4期
20-37
,共18页
程颖%ANEBA Swida%CHORVAT Jr.Dusan%BASSIEN-Capasa Valerie%臧伟进%CHORVATOVA Alzbeta
程穎%ANEBA Swida%CHORVAT Jr.Dusan%BASSIEN-Capasa Valerie%臧偉進%CHORVATOVA Alzbeta
정영%ANEBA Swida%CHORVAT Jr.Dusan%BASSIEN-Capasa Valerie%장위진%CHORVATOVA Alzbeta
NAD(P)H%自发荧光%光谱分辨的荧光寿命%线粒体%存活心肌细胞
NAD(P)H%自髮熒光%光譜分辨的熒光壽命%線粒體%存活心肌細胞
NAD(P)H%자발형광%광보분변적형광수명%선립체%존활심기세포
目的 研究实验动物心肌线粒体氧化还原状态,监测缺血时线粒体功能改变的早期信号.方法 线粒体呼吸链主要电子供应者烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸,或NAD(P)H荧光为无创荧光标记,用光谱分辨的时间相关单光子计数(TCSPC)检测紫外光(UV)激发的心肌自发荧光(AF)光谱和荧光寿命.结果 需用至少3个荧光寿命池0.4～0.7 ns,1.2～1.9 ns和8.0～13.0 ns描述心肌AF.相关衰减光谱(DAS)显示4个NAD(P)H荧光固有光谱,分别为峰值470 nm的短荧光寿命池,及450 nm,470 nm和490 nm的中间和长荧光寿命池.酮体增加线粒体NADH产量,提高AF强度,但不改变荧光寿命.线粒体呼吸阻断剂Rotenone,显著增加AF强度和缩短平均荧光寿命.氧化磷酸化解偶联剂Dinitrophenol (DNP),显著降低AF强度,在520 nm处增宽荧光光谱并显著延长平均荧光寿命.这些结果和NADH荧光动力学离体实验(in vitro)及模拟缺血状态实验有可比性.结论 研究可解释NADH构象改变,以及从NADH到异戎酸脱氢酶(LipDH)结合的黄素蛋白间能量转移的荧光动力学变化.光谱分辨的荧光寿命显微技术提供了在细胞水平上研究心肌能量代谢或线粒体功能障碍的新工具.
目的 研究實驗動物心肌線粒體氧化還原狀態,鑑測缺血時線粒體功能改變的早期信號.方法 線粒體呼吸鏈主要電子供應者煙酰胺腺嘌呤(燐痠)二覈苷痠,或NAD(P)H熒光為無創熒光標記,用光譜分辨的時間相關單光子計數(TCSPC)檢測紫外光(UV)激髮的心肌自髮熒光(AF)光譜和熒光壽命.結果 需用至少3箇熒光壽命池0.4～0.7 ns,1.2～1.9 ns和8.0～13.0 ns描述心肌AF.相關衰減光譜(DAS)顯示4箇NAD(P)H熒光固有光譜,分彆為峰值470 nm的短熒光壽命池,及450 nm,470 nm和490 nm的中間和長熒光壽命池.酮體增加線粒體NADH產量,提高AF彊度,但不改變熒光壽命.線粒體呼吸阻斷劑Rotenone,顯著增加AF彊度和縮短平均熒光壽命.氧化燐痠化解偶聯劑Dinitrophenol (DNP),顯著降低AF彊度,在520 nm處增寬熒光光譜併顯著延長平均熒光壽命.這些結果和NADH熒光動力學離體實驗(in vitro)及模擬缺血狀態實驗有可比性.結論 研究可解釋NADH構象改變,以及從NADH到異戎痠脫氫酶(LipDH)結閤的黃素蛋白間能量轉移的熒光動力學變化.光譜分辨的熒光壽命顯微技術提供瞭在細胞水平上研究心肌能量代謝或線粒體功能障礙的新工具.
목적 연구실험동물심기선립체양화환원상태,감측결혈시선립체공능개변적조기신호.방법 선립체호흡련주요전자공응자연선알선표령(린산)이핵감산,혹NAD(P)H형광위무창형광표기,용광보분변적시간상관단광자계수(TCSPC)검측자외광(UV)격발적심기자발형광(AF)광보화형광수명.결과 수용지소3개형광수명지0.4～0.7 ns,1.2～1.9 ns화8.0～13.0 ns묘술심기AF.상관쇠감광보(DAS)현시4개NAD(P)H형광고유광보,분별위봉치470 nm적단형광수명지,급450 nm,470 nm화490 nm적중간화장형광수명지.동체증가선립체NADH산량,제고AF강도,단불개변형광수명.선립체호흡조단제Rotenone,현저증가AF강도화축단평균형광수명.양화린산화해우련제Dinitrophenol (DNP),현저강저AF강도,재520 nm처증관형광광보병현저연장평균형광수명.저사결과화NADH형광동역학리체실험(in vitro)급모의결혈상태실험유가비성.결론 연구가해석NADH구상개변,이급종NADH도이융산탈경매(LipDH)결합적황소단백간능량전이적형광동역학변화.광보분변적형광수명현미기술제공료재세포수평상연구심기능량대사혹선립체공능장애적신공구.
