中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2012年
3期
17-21
,共5页
罗玄%张海涛%尹秀凤%黄显明%靳宇田%张小飞%潘玲
囉玄%張海濤%尹秀鳳%黃顯明%靳宇田%張小飛%潘玲
라현%장해도%윤수봉%황현명%근우전%장소비%반령
Ⅰ型鸭肝炎病毒%vp3基因%截短%克隆表达
Ⅰ型鴨肝炎病毒%vp3基因%截短%剋隆錶達
Ⅰ형압간염병독%vp3기인%절단%극륭표체
根据Ⅰ型鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus type Ⅰ,DHV-Ⅰ) A66株vp3基因序列,设计了一对扩增vp3截短基因(-468bp)的特异性引物,将vp3截短基因与表达载体pET-32a(+)连接,构建了vp3截短基因的重组表达质粒pET-VP468.pET-VP468转入表达菌E Coli Rosetta-gami(DE3)pLysS中,使用IPTG诱导表达融合蛋白Trx-VP468.Trx-VP468经过Ni-NTA亲和层析柱和DEAE-Sepharose阴离子柱纯化,SDS-PAGE电泳结果表明,pET-VP468在大肠杆菌中表达了一个相对分子量约为36kDa的蛋白,免疫印迹试验表明Trx-VP468得到了正确表达.该结果为VP3蛋白的免疫学功能研究奠定了基础.
根據Ⅰ型鴨肝炎病毒(Duck hepatitis virus type Ⅰ,DHV-Ⅰ) A66株vp3基因序列,設計瞭一對擴增vp3截短基因(-468bp)的特異性引物,將vp3截短基因與錶達載體pET-32a(+)連接,構建瞭vp3截短基因的重組錶達質粒pET-VP468.pET-VP468轉入錶達菌E Coli Rosetta-gami(DE3)pLysS中,使用IPTG誘導錶達融閤蛋白Trx-VP468.Trx-VP468經過Ni-NTA親和層析柱和DEAE-Sepharose陰離子柱純化,SDS-PAGE電泳結果錶明,pET-VP468在大腸桿菌中錶達瞭一箇相對分子量約為36kDa的蛋白,免疫印跡試驗錶明Trx-VP468得到瞭正確錶達.該結果為VP3蛋白的免疫學功能研究奠定瞭基礎.
근거Ⅰ형압간염병독(Duck hepatitis virus type Ⅰ,DHV-Ⅰ) A66주vp3기인서렬,설계료일대확증vp3절단기인(-468bp)적특이성인물,장vp3절단기인여표체재체pET-32a(+)련접,구건료vp3절단기인적중조표체질립pET-VP468.pET-VP468전입표체균E Coli Rosetta-gami(DE3)pLysS중,사용IPTG유도표체융합단백Trx-VP468.Trx-VP468경과Ni-NTA친화층석주화DEAE-Sepharose음리자주순화,SDS-PAGE전영결과표명,pET-VP468재대장간균중표체료일개상대분자량약위36kDa적단백,면역인적시험표명Trx-VP468득도료정학표체.해결과위VP3단백적면역학공능연구전정료기출.
