中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2012年
3期
12-16
,共5页
赵宗正%涂加钢%张文婷%胡勇%周红波%金梅林
趙宗正%塗加鋼%張文婷%鬍勇%週紅波%金梅林
조종정%도가강%장문정%호용%주홍파%금매림
甲型H1N1流感病毒%NS1%多克隆抗体%核仁定位
甲型H1N1流感病毒%NS1%多剋隆抗體%覈仁定位
갑형H1N1류감병독%NS1%다극륭항체%핵인정위
为研究2009年甲型H1N1流感病毒的NS1蛋白的核仁定位情况,采用RT-PCR对其NS1基因进行了扩增,将其克隆至PEGX-KG载体,构建重组质粒KG-NS1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白.然后采用GST柱亲和层析方法纯化NS1重组蛋白,免疫家兔来制备多抗,Western blot检测抗体.通过间接免疫荧光对表达不同长度NS1 (NS1-219、NS1-230、NS1-237)的3种重组流感病毒进行了核仁定位的研究,3种重组毒的NS1蛋白存在于细胞核和细胞质,但都不能定位于核仁,说明NS1蛋白的截短与否并不影响其核仁定位,其生物学意义有待于进一步研究.
為研究2009年甲型H1N1流感病毒的NS1蛋白的覈仁定位情況,採用RT-PCR對其NS1基因進行瞭擴增,將其剋隆至PEGX-KG載體,構建重組質粒KG-NS1,轉化大腸桿菌BL21,IPTG誘導錶達重組蛋白.然後採用GST柱親和層析方法純化NS1重組蛋白,免疫傢兔來製備多抗,Western blot檢測抗體.通過間接免疫熒光對錶達不同長度NS1 (NS1-219、NS1-230、NS1-237)的3種重組流感病毒進行瞭覈仁定位的研究,3種重組毒的NS1蛋白存在于細胞覈和細胞質,但都不能定位于覈仁,說明NS1蛋白的截短與否併不影響其覈仁定位,其生物學意義有待于進一步研究.
위연구2009년갑형H1N1류감병독적NS1단백적핵인정위정황,채용RT-PCR대기NS1기인진행료확증,장기극륭지PEGX-KG재체,구건중조질립KG-NS1,전화대장간균BL21,IPTG유도표체중조단백.연후채용GST주친화층석방법순화NS1중조단백,면역가토래제비다항,Western blot검측항체.통과간접면역형광대표체불동장도NS1 (NS1-219、NS1-230、NS1-237)적3충중조류감병독진행료핵인정위적연구,3충중조독적NS1단백존재우세포핵화세포질,단도불능정위우핵인,설명NS1단백적절단여부병불영향기핵인정위,기생물학의의유대우진일보연구.
