中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2012年
4期
7-12
,共6页
邓绪芳%史子学%魏建超%邵东华%王少辉%李蓓蓓%马志永
鄧緒芳%史子學%魏建超%邵東華%王少輝%李蓓蓓%馬誌永
산서방%사자학%위건초%소동화%왕소휘%리배배%마지영
日本脑炎病毒%NS3%细胞定位
日本腦炎病毒%NS3%細胞定位
일본뇌염병독%NS3%세포정위
根据GenBank发表的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因序列,合成用于克隆编码病毒NS3蛋白C端的基因片段(955～1857 bp)的引物.从感染JEV的细胞样品中,采用RT-PCR扩增出大小约900 bp的目的片段,插入到pET-28a(+)表达载体,诱导表达出NS3C蛋白.将该重组蛋白免疫小鼠制备NS3C抗血清,通过间接免疫荧光和Western blot验证,该抗血清能特异识别JEV感染Vero细胞中的NS3蛋白.使用该抗血清研究了JEV在神经细胞内的亚定位,发现NS3主要定位于JEV感染的神经细胞的胞浆中,并在细胞核周围分布明显.
根據GenBank髮錶的日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因序列,閤成用于剋隆編碼病毒NS3蛋白C耑的基因片段(955～1857 bp)的引物.從感染JEV的細胞樣品中,採用RT-PCR擴增齣大小約900 bp的目的片段,插入到pET-28a(+)錶達載體,誘導錶達齣NS3C蛋白.將該重組蛋白免疫小鼠製備NS3C抗血清,通過間接免疫熒光和Western blot驗證,該抗血清能特異識彆JEV感染Vero細胞中的NS3蛋白.使用該抗血清研究瞭JEV在神經細胞內的亞定位,髮現NS3主要定位于JEV感染的神經細胞的胞漿中,併在細胞覈週圍分佈明顯.
근거GenBank발표적일본뇌염병독(Japanese encephalitis virus,JEV)기인서렬,합성용우극륭편마병독NS3단백C단적기인편단(955～1857 bp)적인물.종감염JEV적세포양품중,채용RT-PCR확증출대소약900 bp적목적편단,삽입도pET-28a(+)표체재체,유도표체출NS3C단백.장해중조단백면역소서제비NS3C항혈청,통과간접면역형광화Western blot험증,해항혈청능특이식별JEV감염Vero세포중적NS3단백.사용해항혈청연구료JEV재신경세포내적아정위,발현NS3주요정위우JEV감염적신경세포적포장중,병재세포핵주위분포명현.
