中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2012年
3期
55-61
,共7页
宋宁宁%刘迎春%陈永军%蒋蔚%石金磊%杨康%王权
宋寧寧%劉迎春%陳永軍%蔣蔚%石金磊%楊康%王權
송저저%류영춘%진영군%장위%석금뢰%양강%왕권
呋喃妥因代谢物%人工抗原%合成%鉴定
呋喃妥因代謝物%人工抗原%閤成%鑒定
부남타인대사물%인공항원%합성%감정
利用对醛基苯甲酸对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)进行衍生化,衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)通过混合酸酐法与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,用紫外扫描(UV)和变性凝胶电泳(SDS-PAGE)对偶联物进行验证.将偶联成功的人工全抗原(CPAHD-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清抗体效价为1∶32000.用间接竞争ELISA鉴定抗体特性,结果显示:抗体对AHD与对硝基苯甲醛的衍生物(NPAHD)的灵敏度高,IC50为30.63 μg/L,特异性好,与CPAHD有部分交叉反应外,与其他3类硝基呋喃类药物及代谢产物无交叉反应(交叉反应率＜0.01％).结果表明,用CPAHD-BSA作免疫原免疫小鼠可诱导产生针对AHD衍生物(NPAHD)的特异性抗体,为进一步制备AHD单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础.
利用對醛基苯甲痠對呋喃妥因代謝物1-氨基乙內酰脲(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)進行衍生化,衍生物1-氨基乙內酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)通過混閤痠酐法與牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶聯,用紫外掃描(UV)和變性凝膠電泳(SDS-PAGE)對偶聯物進行驗證.將偶聯成功的人工全抗原(CPAHD-BSA)免疫BALB/c小鼠,通過間接酶聯免疫吸附法(ELISA)測定小鼠血清抗體效價為1∶32000.用間接競爭ELISA鑒定抗體特性,結果顯示:抗體對AHD與對硝基苯甲醛的衍生物(NPAHD)的靈敏度高,IC50為30.63 μg/L,特異性好,與CPAHD有部分交扠反應外,與其他3類硝基呋喃類藥物及代謝產物無交扠反應(交扠反應率＜0.01％).結果錶明,用CPAHD-BSA作免疫原免疫小鼠可誘導產生針對AHD衍生物(NPAHD)的特異性抗體,為進一步製備AHD單剋隆抗體和研製快速篩選檢測試劑盒奠定瞭基礎.
이용대철기분갑산대부남타인대사물1-안기을내선뇨(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)진행연생화,연생물1-안기을내선뇨-4-최분기우(CPAHD)통과혼합산항법여우혈청단백(bovine serum albumin,BSA)우련,용자외소묘(UV)화변성응효전영(SDS-PAGE)대우련물진행험증.장우련성공적인공전항원(CPAHD-BSA)면역BALB/c소서,통과간접매련면역흡부법(ELISA)측정소서혈청항체효개위1∶32000.용간접경쟁ELISA감정항체특성,결과현시:항체대AHD여대초기분갑철적연생물(NPAHD)적령민도고,IC50위30.63 μg/L,특이성호,여CPAHD유부분교차반응외,여기타3류초기부남류약물급대사산물무교차반응(교차반응솔＜0.01％).결과표명,용CPAHD-BSA작면역원면역소서가유도산생침대AHD연생물(NPAHD)적특이성항체,위진일보제비AHD단극륭항체화연제쾌속사선검측시제합전정료기출.
