湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2012年
22期
5197-5199,5204
,共4页
褚秀玲%苏建青%江成%张吉清%马秀亮
褚秀玲%囌建青%江成%張吉清%馬秀亮
저수령%소건청%강성%장길청%마수량
犬SLAM基因%真核表达载体%稳定细胞系
犬SLAM基因%真覈錶達載體%穩定細胞繫
견SLAM기인%진핵표체재체%은정세포계
为了构建稳定表达犬信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的MDCK细胞系,该研究从犬外周血淋巴细胞中克隆了犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)细胞受体SLAM基因,将鉴定正确的SLAM基因插入到高效真核表达载体pcDNA3.1(+)中.采用脂质体转染的方式将重组质粒pcDNA3.1/SLAM转染到MDCK细胞中,采用G418加压筛选及有限稀释法克隆,获取稳定表达SLAM的MDCK细胞株.结果表明,成功构建了SLAM的真核表达载体pcDNA3.1/SLAM,并通过G418筛选获得了稳定表达SLAM的细胞系MDCK.
為瞭構建穩定錶達犬信號淋巴細胞激活因子(SLAM)的MDCK細胞繫,該研究從犬外週血淋巴細胞中剋隆瞭犬瘟熱病毒(Canine distemper virus,CDV)細胞受體SLAM基因,將鑒定正確的SLAM基因插入到高效真覈錶達載體pcDNA3.1(+)中.採用脂質體轉染的方式將重組質粒pcDNA3.1/SLAM轉染到MDCK細胞中,採用G418加壓篩選及有限稀釋法剋隆,穫取穩定錶達SLAM的MDCK細胞株.結果錶明,成功構建瞭SLAM的真覈錶達載體pcDNA3.1/SLAM,併通過G418篩選穫得瞭穩定錶達SLAM的細胞繫MDCK.
위료구건은정표체견신호림파세포격활인자(SLAM)적MDCK세포계,해연구종견외주혈림파세포중극륭료견온열병독(Canine distemper virus,CDV)세포수체SLAM기인,장감정정학적SLAM기인삽입도고효진핵표체재체pcDNA3.1(+)중.채용지질체전염적방식장중조질립pcDNA3.1/SLAM전염도MDCK세포중,채용G418가압사선급유한희석법극륭,획취은정표체SLAM적MDCK세포주.결과표명,성공구건료SLAM적진핵표체재체pcDNA3.1/SLAM,병통과G418사선획득료은정표체SLAM적세포계MDCK.
