西部林业科学
西部林業科學
서부임업과학
JOURNAL OF WEST CHINA FORESTRY SCIENCE
2013年
1期
81-85
,共5页
朱东阳%尹继庭%丁勇%储晓%凡春梅%龚秀会%刘小烛%赵平
硃東暘%尹繼庭%丁勇%儲曉%凡春梅%龔秀會%劉小燭%趙平
주동양%윤계정%정용%저효%범춘매%공수회%류소충%조평
樟叶越桔%叶芽%总RNA%提取方法
樟葉越桔%葉芽%總RNA%提取方法
장협월길%협아%총RNA%제취방법
本项实验采用改良CTAB、改良SDS、RNApure Plant Kit和Plant RNA Kit 4种方法提取樟叶越桔叶芽总RNA,以期获得适合于樟叶越桔叶芽高质量总RNA的最佳提取方法.总RNA纯度和完整性分别用紫外分光光度计法和琼脂糖凝胶电泳法检测.结果表明,采用改良CTAB和Plant RNA Kit法获得的RNA完整性好,纯度高,A260/A280值分别为2.07和2.08,28S和18S rRNA条带清晰,且前者的亮度约为后者的2倍,无弥散现象.将改良CTAB和Plant RNA Kit法获得的总RNA进行RT-PCR扩增,成功克隆获得了樟叶越桔花色苷5-芳香族酰基转移酶基因长316 bp的cDNA序列.证明改良CTAB和Plant RNA Kit法是樟叶越桔叶芽高质量总RNA的最适提取方法.
本項實驗採用改良CTAB、改良SDS、RNApure Plant Kit和Plant RNA Kit 4種方法提取樟葉越桔葉芽總RNA,以期穫得適閤于樟葉越桔葉芽高質量總RNA的最佳提取方法.總RNA純度和完整性分彆用紫外分光光度計法和瓊脂糖凝膠電泳法檢測.結果錶明,採用改良CTAB和Plant RNA Kit法穫得的RNA完整性好,純度高,A260/A280值分彆為2.07和2.08,28S和18S rRNA條帶清晰,且前者的亮度約為後者的2倍,無瀰散現象.將改良CTAB和Plant RNA Kit法穫得的總RNA進行RT-PCR擴增,成功剋隆穫得瞭樟葉越桔花色苷5-芳香族酰基轉移酶基因長316 bp的cDNA序列.證明改良CTAB和Plant RNA Kit法是樟葉越桔葉芽高質量總RNA的最適提取方法.
본항실험채용개량CTAB、개량SDS、RNApure Plant Kit화Plant RNA Kit 4충방법제취장협월길협아총RNA,이기획득괄합우장협월길협아고질량총RNA적최가제취방법.총RNA순도화완정성분별용자외분광광도계법화경지당응효전영법검측.결과표명,채용개량CTAB화Plant RNA Kit법획득적RNA완정성호,순도고,A260/A280치분별위2.07화2.08,28S화18S rRNA조대청석,차전자적량도약위후자적2배,무미산현상.장개량CTAB화Plant RNA Kit법획득적총RNA진행RT-PCR확증,성공극륭획득료장협월길화색감5-방향족선기전이매기인장316 bp적cDNA서렬.증명개량CTAB화Plant RNA Kit법시장협월길협아고질량총RNA적최괄제취방법.
