中国神经精神疾病杂志
中國神經精神疾病雜誌
중국신경정신질병잡지
CHINESE JOURNAL OF NERVOUS AND MENTAL DISEASES
2013年
2期
102-106
,共5页
荆婧%王雪晶%马耀华%祝应俊%丁晓岚%滕军放
荊婧%王雪晶%馬耀華%祝應俊%丁曉嵐%滕軍放
형청%왕설정%마요화%축응준%정효람%등군방
α-synuclein(A53T)%自噬%凋亡
α-synuclein(A53T)%自噬%凋亡
α-synuclein(A53T)%자서%조망
目的 探讨α-synuclein (A53T)突变蛋白诱导神经元凋亡的具体机制.方法 将EGFP-N1、EGFP-α-synuclein (WT)及EGFP-α-synuclein (A53T)质粒转染SH-SY5Y细胞,Western blot检测Beclin 1及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平;MDC染色检测细胞自噬空泡的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;MTT法测定细胞相对活力.结果 过表达EGFP-α-synuclein (A53T)上调细胞内源性Beclin 1蛋白的水平,差异具有统计学意义(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高,差异具有统计学意义(P<0.05).过表达EGFP-α-synuclein(A53T)诱导SH-SY5Y细胞自噬空泡聚集增加,免疫荧光检测示LC3呈现胞浆聚集.过表达EGFP-α-synuclein(A53T)上调SH-SY5Y细胞凋亡率,差异具有统计学意义(P<0.01);抑制了细胞相对活力,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 EGFP-α-synuclein (A53T)突变蛋白上调巨自噬水平,诱导神经元凋亡.
目的 探討α-synuclein (A53T)突變蛋白誘導神經元凋亡的具體機製.方法 將EGFP-N1、EGFP-α-synuclein (WT)及EGFP-α-synuclein (A53T)質粒轉染SH-SY5Y細胞,Western blot檢測Beclin 1及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ錶達水平;MDC染色檢測細胞自噬空泡的變化;PI/Annexin-V-FITC檢測細胞凋亡率;MTT法測定細胞相對活力.結果 過錶達EGFP-α-synuclein (A53T)上調細胞內源性Beclin 1蛋白的水平,差異具有統計學意義(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高,差異具有統計學意義(P<0.05).過錶達EGFP-α-synuclein(A53T)誘導SH-SY5Y細胞自噬空泡聚集增加,免疫熒光檢測示LC3呈現胞漿聚集.過錶達EGFP-α-synuclein(A53T)上調SH-SY5Y細胞凋亡率,差異具有統計學意義(P<0.01);抑製瞭細胞相對活力,差異具有統計學意義(P<0.05).結論 EGFP-α-synuclein (A53T)突變蛋白上調巨自噬水平,誘導神經元凋亡.
목적 탐토α-synuclein (A53T)돌변단백유도신경원조망적구체궤제.방법 장EGFP-N1、EGFP-α-synuclein (WT)급EGFP-α-synuclein (A53T)질립전염SH-SY5Y세포,Western blot검측Beclin 1급LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ표체수평;MDC염색검측세포자서공포적변화;PI/Annexin-V-FITC검측세포조망솔;MTT법측정세포상대활력.결과 과표체EGFP-α-synuclein (A53T)상조세포내원성Beclin 1단백적수평,차이구유통계학의의(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ적비치승고,차이구유통계학의의(P<0.05).과표체EGFP-α-synuclein(A53T)유도SH-SY5Y세포자서공포취집증가,면역형광검측시LC3정현포장취집.과표체EGFP-α-synuclein(A53T)상조SH-SY5Y세포조망솔,차이구유통계학의의(P<0.01);억제료세포상대활력,차이구유통계학의의(P<0.05).결론 EGFP-α-synuclein (A53T)돌변단백상조거자서수평,유도신경원조망.