中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
2期
6-9
,共4页
谢飞%吴雅琨%冯秋月%陈慧鑫%王安如%彭子欣
謝飛%吳雅琨%馮鞦月%陳慧鑫%王安如%彭子訢
사비%오아곤%풍추월%진혜흠%왕안여%팽자흔
猪β-防御素-2%原核表达%融合蛋白%抗菌活性
豬β-防禦素-2%原覈錶達%融閤蛋白%抗菌活性
저β-방어소-2%원핵표체%융합단백%항균활성
将猪β-防御素-2基因(pBD-2)片段正确连接到pET32a载体上,从而得到稳定表达pBD-2的大肠杆菌表达株.根据已报道的pBD-2基因序列,按大肠杆菌密码子优化原则合成了5条pBD-2基因片段,通过重叠延伸PCR(SOE PCR)方法将这5段延伸成完整的pBD-2基因序列,将该基因定向插入原核表达质粒pET32a的多克隆位点上,成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出TrxA-pBD2融合蛋白.结果显示,表达的融合蛋白用肠激酶切掉TrxA后做琼脂孔穴扩散法检测,pBD-2对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌活性,表明试验获得表达pBD-2的大肠杆菌菌株.
將豬β-防禦素-2基因(pBD-2)片段正確連接到pET32a載體上,從而得到穩定錶達pBD-2的大腸桿菌錶達株.根據已報道的pBD-2基因序列,按大腸桿菌密碼子優化原則閤成瞭5條pBD-2基因片段,通過重疊延伸PCR(SOE PCR)方法將這5段延伸成完整的pBD-2基因序列,將該基因定嚮插入原覈錶達質粒pET32a的多剋隆位點上,成功地在大腸桿菌BL21(DE3)中錶達齣TrxA-pBD2融閤蛋白.結果顯示,錶達的融閤蛋白用腸激酶切掉TrxA後做瓊脂孔穴擴散法檢測,pBD-2對金黃色葡萄毬菌有較好的抑菌活性,錶明試驗穫得錶達pBD-2的大腸桿菌菌株.
장저β-방어소-2기인(pBD-2)편단정학련접도pET32a재체상,종이득도은정표체pBD-2적대장간균표체주.근거이보도적pBD-2기인서렬,안대장간균밀마자우화원칙합성료5조pBD-2기인편단,통과중첩연신PCR(SOE PCR)방법장저5단연신성완정적pBD-2기인서렬,장해기인정향삽입원핵표체질립pET32a적다극륭위점상,성공지재대장간균BL21(DE3)중표체출TrxA-pBD2융합단백.결과현시,표체적융합단백용장격매절도TrxA후주경지공혈확산법검측,pBD-2대금황색포도구균유교호적억균활성,표명시험획득표체pBD-2적대장간균균주.
