武汉工程大学学报
武漢工程大學學報
무한공정대학학보
JOURNAL OF WUHAN INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2013年
2期
37-41
,共5页
朱雄伟%张佑红%徐智鹏%苏腾甲%熊瑶%翟莉莉
硃雄偉%張祐紅%徐智鵬%囌騰甲%熊瑤%翟莉莉
주웅위%장우홍%서지붕%소등갑%웅요%적리리
多克隆抗体%免疫亲和纯化%酶联免疫吸附法%蛋白印迹%聚丙烯酰胺凝胶电泳
多剋隆抗體%免疫親和純化%酶聯免疫吸附法%蛋白印跡%聚丙烯酰胺凝膠電泳
다극륭항체%면역친화순화%매련면역흡부법%단백인적%취병희선알응효전영
为了提纯并鉴定自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体,探讨其在部分组织中的免疫定位.首先合成带谷胱甘肽转移酶标签的自噬基因融合蛋白,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,然后用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测抗体浓度,最后用免疫亲和纯化方法提纯抗血清中的多克隆抗体,酶联免疫吸附法检测抗体效价,蛋白印迹检测抗体特异性及在组织中的表达情况.结果表明:制备得到自噬基因融合蛋白重组多克隆抗体经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其质量浓度为每10 μL含5 μg,用酶联免疫吸附法显示此抗体效价及特异性较高,蛋白印迹显示蛋白大小为55 kD左右.
為瞭提純併鑒定自噬基因融閤蛋白重組多剋隆抗體,探討其在部分組織中的免疫定位.首先閤成帶穀胱甘肽轉移酶標籤的自噬基因融閤蛋白,免疫新西蘭大白兔,製備多剋隆抗體,然後用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測抗體濃度,最後用免疫親和純化方法提純抗血清中的多剋隆抗體,酶聯免疫吸附法檢測抗體效價,蛋白印跡檢測抗體特異性及在組織中的錶達情況.結果錶明:製備得到自噬基因融閤蛋白重組多剋隆抗體經聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測其質量濃度為每10 μL含5 μg,用酶聯免疫吸附法顯示此抗體效價及特異性較高,蛋白印跡顯示蛋白大小為55 kD左右.
위료제순병감정자서기인융합단백중조다극륭항체,탐토기재부분조직중적면역정위.수선합성대곡광감태전이매표첨적자서기인융합단백,면역신서란대백토,제비다극륭항체,연후용취병희선알응효전영검측항체농도,최후용면역친화순화방법제순항혈청중적다극륭항체,매련면역흡부법검측항체효개,단백인적검측항체특이성급재조직중적표체정황.결과표명:제비득도자서기인융합단백중조다극륭항체경취병희선알응효전영검측기질량농도위매10 μL함5 μg,용매련면역흡부법현시차항체효개급특이성교고,단백인적현시단백대소위55 kD좌우.
