中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2013年
5期
1109-1111
,共3页
张晶%梁小亮%黄连江%袁玉涛%孙红琰
張晶%樑小亮%黃連江%袁玉濤%孫紅琰
장정%량소량%황련강%원옥도%손홍염
VEGF%DFF40%原核表达%大肠杆菌%纯化%MTT法%抗肿瘤
VEGF%DFF40%原覈錶達%大腸桿菌%純化%MTT法%抗腫瘤
VEGF%DFF40%원핵표체%대장간균%순화%MTT법%항종류
目的 在大肠杆菌中表达VEGF-DFF40基因并纯化融合蛋白,MTT法检测其体外抗肿瘤活性.方法 用RT-PCR法扩增目的基因,两基因连接并在PET28a中表达,对产物进行SDS-PAGE电泳及Western印迹分析;体外培养HepG2细胞,HUVEC细胞,用MTT法检测4种浓度VEGF-DFF40融合蛋白及PBS的细胞毒性.结果 成功构建了重组表达质粒,并纯化出高纯度的融合蛋白,MTT法融合蛋白对两种细胞的直接作用与PBS组均有显著性差异(P<0.01),提示此融合蛋白对两种细胞均有直接杀伤作用.结论 本研究成功获得了高纯度的VEGF121-DFF40融合蛋白,并初步证明其具有免疫学活性,为更进一步研究其生物学活性奠定了基础.
目的 在大腸桿菌中錶達VEGF-DFF40基因併純化融閤蛋白,MTT法檢測其體外抗腫瘤活性.方法 用RT-PCR法擴增目的基因,兩基因連接併在PET28a中錶達,對產物進行SDS-PAGE電泳及Western印跡分析;體外培養HepG2細胞,HUVEC細胞,用MTT法檢測4種濃度VEGF-DFF40融閤蛋白及PBS的細胞毒性.結果 成功構建瞭重組錶達質粒,併純化齣高純度的融閤蛋白,MTT法融閤蛋白對兩種細胞的直接作用與PBS組均有顯著性差異(P<0.01),提示此融閤蛋白對兩種細胞均有直接殺傷作用.結論 本研究成功穫得瞭高純度的VEGF121-DFF40融閤蛋白,併初步證明其具有免疫學活性,為更進一步研究其生物學活性奠定瞭基礎.
목적 재대장간균중표체VEGF-DFF40기인병순화융합단백,MTT법검측기체외항종류활성.방법 용RT-PCR법확증목적기인,량기인련접병재PET28a중표체,대산물진행SDS-PAGE전영급Western인적분석;체외배양HepG2세포,HUVEC세포,용MTT법검측4충농도VEGF-DFF40융합단백급PBS적세포독성.결과 성공구건료중조표체질립,병순화출고순도적융합단백,MTT법융합단백대량충세포적직접작용여PBS조균유현저성차이(P<0.01),제시차융합단백대량충세포균유직접살상작용.결론 본연구성공획득료고순도적VEGF121-DFF40융합단백,병초보증명기구유면역학활성,위경진일보연구기생물학활성전정료기출.