CAJ | 학술논문

本研究采用改良Thiaucourt's培养基培养绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovi pleuneniae,MO)临床分离株SC01,收集不同时间的培养物,分别用颜色变化单位(CCU)法、浊度法及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法进行定量,并绘制MO生长动态曲线.CCU检测结果显示,接种后0～4 h为SC01的迟缓期,4～16 h为对数生长期,lg CCU/mL最高达到10.7000±0.4700,16～20 h为稳定期,20 h以后进入衰亡期；浊度法定量检测结果显示,SC01培养物经过5倍浓缩后的D420nm随着培养时间延长逐渐上升,2h时为0.0028±0.0002,4～12 hD420nm增加较缓慢,而12～24 h增加最快,24 h最高达到0.8609±0.0045,以后则趋于稳定；Real-time PCR法检测结果显示,SC01的拷贝数随着培养时间延长平稳上升,2h时lg拷贝/mL为4.5889±0.0048,在30 h时 lg拷贝/mL达到7.6165±0.1089.相关性分析结果表明,在迟缓期和对数生长期,CCU法与Real-time PCR法、CCU法与浊度法、Real-time PCR法与浊度法对MO的定量检测结果高度相关,相关系数分别为0.967、0.720和0.849,而Real-time PCR法和浊度法对MO的定量检测结果则在2～30 h内均高度相关,相关系数为0.912.经对检测所需时间及精确度等方面综合比较,本研究认为Re-time PCR法具有快速、准确及易标准化等特点,可以取代CCU法和浊度法用于MO的定量.
본연구채용개량Thiaucourt's배양기배양면양폐염지원체(Mycoplasma ovi pleuneniae,MO)림상분리주SC01,수집불동시간적배양물,분별용안색변화단위(CCU)법、탁도법급실시형광정량PCR(Real-time PCR)법진행정량,병회제MO생장동태곡선.CCU검측결과현시,접충후0～4 h위SC01적지완기,4～16 h위대수생장기,lg CCU/mL최고체도10.7000±0.4700,16～20 h위은정기,20 h이후진입쇠망기；탁도법정량검측결과현시,SC01배양물경과5배농축후적D420nm수착배양시간연장축점상승,2h시위0.0028±0.0002,4～12 hD420nm증가교완만,이12～24 h증가최쾌,24 h최고체도0.8609±0.0045,이후칙추우은정；Real-time PCR법검측결과현시,SC01적고패수수착배양시간연장평은상승,2h시lg고패/mL위4.5889±0.0048,재30 h시 lg고패/mL체도7.6165±0.1089.상관성분석결과표명,재지완기화대수생장기,CCU법여Real-time PCR법、CCU법여탁도법、Real-time PCR법여탁도법대MO적정량검측결과고도상관,상관계수분별위0.967、0.720화0.849,이Real-time PCR법화탁도법대MO적정량검측결과칙재2～30 h내균고도상관,상관계수위0.912.경대검측소수시간급정학도등방면종합비교,본연구인위Re-time PCR법구유쾌속、준학급역표준화등특점,가이취대CCU법화탁도법용우MO적정량.