中国动物传染病学报
中國動物傳染病學報
중국동물전염병학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY
2013年
1期
53-59
,共7页
张志强%姜露%李永慧%段强德%朱国强
張誌彊%薑露%李永慧%段彊德%硃國彊
장지강%강로%리영혜%단강덕%주국강
大肠杆菌%F18菌毛%Red重组系统%Stx2e基因%突变株
大腸桿菌%F18菌毛%Red重組繫統%Stx2e基因%突變株
대장간균%F18균모%Red중조계통%Stx2e기인%돌변주
水肿病是能由产志贺样毒素型大肠杆菌产生的Stx2e毒素引起的一种细菌传染病,对断奶仔猪有较高的致死率,常造成较大的经济.当前,Stx2e毒素影响病原菌与靶细胞之间的相互作用机制不明确,Stx2e基因缺失株作为后选疫苗的潜力有待确认.本研究中我们利用Red重组系统构建了大肠杆菌1522 (serotype O139:K12:H1)和1525 (serotype O157:H19)的Stx2e基因缺失株,并通过PCR检验,DNA测序手段以及Vero细胞毒性试验在细胞水平加以验证.研究发现,在同样的培养条件下,1522△Stx2e株的生长特性与原型株相比没有差异,其分解发酵糖类和氨基酸的能力也未发生改变,但是相较野生株,Stx2e基因缺失株粘附猪肠上皮细胞IPEC-J2的能力大幅度降低,可达30％.将表达K99菌毛操纵子基因克隆入1522△Stx2e中,该重组菌能够同时表达K99菌毛和自身的F18菌毛基因,且该重组株的粘附IPEC-J2细胞能力相较原型株增强近l倍.
水腫病是能由產誌賀樣毒素型大腸桿菌產生的Stx2e毒素引起的一種細菌傳染病,對斷奶仔豬有較高的緻死率,常造成較大的經濟.噹前,Stx2e毒素影響病原菌與靶細胞之間的相互作用機製不明確,Stx2e基因缺失株作為後選疫苗的潛力有待確認.本研究中我們利用Red重組繫統構建瞭大腸桿菌1522 (serotype O139:K12:H1)和1525 (serotype O157:H19)的Stx2e基因缺失株,併通過PCR檢驗,DNA測序手段以及Vero細胞毒性試驗在細胞水平加以驗證.研究髮現,在同樣的培養條件下,1522△Stx2e株的生長特性與原型株相比沒有差異,其分解髮酵糖類和氨基痠的能力也未髮生改變,但是相較野生株,Stx2e基因缺失株粘附豬腸上皮細胞IPEC-J2的能力大幅度降低,可達30％.將錶達K99菌毛操縱子基因剋隆入1522△Stx2e中,該重組菌能夠同時錶達K99菌毛和自身的F18菌毛基因,且該重組株的粘附IPEC-J2細胞能力相較原型株增彊近l倍.
수종병시능유산지하양독소형대장간균산생적Stx2e독소인기적일충세균전염병,대단내자저유교고적치사솔,상조성교대적경제.당전,Stx2e독소영향병원균여파세포지간적상호작용궤제불명학,Stx2e기인결실주작위후선역묘적잠력유대학인.본연구중아문이용Red중조계통구건료대장간균1522 (serotype O139:K12:H1)화1525 (serotype O157:H19)적Stx2e기인결실주,병통과PCR검험,DNA측서수단이급Vero세포독성시험재세포수평가이험증.연구발현,재동양적배양조건하,1522△Stx2e주적생장특성여원형주상비몰유차이,기분해발효당류화안기산적능력야미발생개변,단시상교야생주,Stx2e기인결실주점부저장상피세포IPEC-J2적능력대폭도강저,가체30％.장표체K99균모조종자기인극륭입1522△Stx2e중,해중조균능구동시표체K99균모화자신적F18균모기인,차해중조주적점부IPEC-J2세포능력상교원형주증강근l배.
