CAJ | 학술논문

为控制在我国流行的H5N1高致病性禽流感(Avian influenza virus,AIV)和筛选具有标记的疫苗毒株,用流行的H5N1亚型AIV的HA基因和H9N2亚型AIV的NA基因及H1N1亚型AIV(A/PR/8/34毒株)的6个内部基因通过流感8质粒反向遗传操作系统拯救了重组病毒rH5N2/PR8株.为了降低重组病毒的毒力,对H5N1亚型AIV的HA基因进行了修饰,使其裂解模式由PLRERRRKR ↓ GL修饰为PLIETR ↓ GL.将获得的rH5N2/PR8株在9日龄SPF鸡胚上连续传10代.该重组病毒的血凝效价稳定在1:2048,其半数感染量(EID50)可达10-877/0.1 mL.该病毒的毒力显著降低,对鸡胚的半数致死量(ELD50)为10-5/0.1 mL.将该病毒灭活与油佐剂乳化,制成灭活疫苗,给6周龄SFP鸡接种不同剂量,接种21d后,用H5NI流行野毒A/Chicken/SD/2010 (H5N1)攻击,结果显示:接种剂量为0.1 mL/只的试验组,10只鸡中有5只获得保护；接种0.3 mL/只的试验组可获得100％保护.以上说明,本实验获得的重组病毒具有疫苗标记、繁殖滴度高、毒力低、免疫原性好等特点,非常适合作为“标记疫苗”候选株,为AIV(H5N1)的标记疫苗研发奠定了坚实基础.
위공제재아국류행적H5N1고치병성금류감(Avian influenza virus,AIV)화사선구유표기적역묘독주,용류행적H5N1아형AIV적HA기인화H9N2아형AIV적NA기인급H1N1아형AIV(A/PR/8/34독주)적6개내부기인통과류감8질립반향유전조작계통증구료중조병독rH5N2/PR8주.위료강저중조병독적독력,대H5N1아형AIV적HA기인진행료수식,사기렬해모식유PLRERRRKR ↓ GL수식위PLIETR ↓ GL.장획득적rH5N2/PR8주재9일령SPF계배상련속전10대.해중조병독적혈응효개은정재1:2048,기반수감염량(EID50)가체10-877/0.1 mL.해병독적독력현저강저,대계배적반수치사량(ELD50)위10-5/0.1 mL.장해병독멸활여유좌제유화,제성멸활역묘,급6주령SFP계접충불동제량,접충21d후,용H5NI류행야독A/Chicken/SD/2010 (H5N1)공격,결과현시:접충제량위0.1 mL/지적시험조,10지계중유5지획득보호；접충0.3 mL/지적시험조가획득100％보호.이상설명,본실험획득적중조병독구유역묘표기、번식적도고、독력저、면역원성호등특점,비상괄합작위“표기역묘”후선주,위AIV(H5N1)적표기역묘연발전정료견실기출.