新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
1期
33-37
,共5页
玉米%CIPK%蛋白纯化
玉米%CIPK%蛋白純化
옥미%CIPK%단백순화
[目的]分析玉米ZmCIPK42序列,诱导蛋白表达,并获得纯化的蛋白.[方法]利用蛋白分析软件分析ZmCIPK42性质及磷酸化作用位点,构建ZmCIPK2-pET30a原核表达载体,用IPTG诱导蛋白表达,用NiNTA树脂纯化蛋白.[结果]ZmCIPK42具有典型的CIPK家族基因的N端激酶结构域和C端NAF调控域,激酶结构域内有较多磷酸化位点,原核表达的ZmCIPK42主要以包涵体形式存在,用Ni-NTA树脂可以纯化获得有活性的ZmCIPK42蛋白.[结论]28℃诱导后ZmCIPK42可以有活性的蛋白.用His作为标签纯化ZmCIPK42蛋白,可高效获得大量纯化蛋白.
[目的]分析玉米ZmCIPK42序列,誘導蛋白錶達,併穫得純化的蛋白.[方法]利用蛋白分析軟件分析ZmCIPK42性質及燐痠化作用位點,構建ZmCIPK2-pET30a原覈錶達載體,用IPTG誘導蛋白錶達,用NiNTA樹脂純化蛋白.[結果]ZmCIPK42具有典型的CIPK傢族基因的N耑激酶結構域和C耑NAF調控域,激酶結構域內有較多燐痠化位點,原覈錶達的ZmCIPK42主要以包涵體形式存在,用Ni-NTA樹脂可以純化穫得有活性的ZmCIPK42蛋白.[結論]28℃誘導後ZmCIPK42可以有活性的蛋白.用His作為標籤純化ZmCIPK42蛋白,可高效穫得大量純化蛋白.
[목적]분석옥미ZmCIPK42서렬,유도단백표체,병획득순화적단백.[방법]이용단백분석연건분석ZmCIPK42성질급린산화작용위점,구건ZmCIPK2-pET30a원핵표체재체,용IPTG유도단백표체,용NiNTA수지순화단백.[결과]ZmCIPK42구유전형적CIPK가족기인적N단격매결구역화C단NAF조공역,격매결구역내유교다린산화위점,원핵표체적ZmCIPK42주요이포함체형식존재,용Ni-NTA수지가이순화획득유활성적ZmCIPK42단백.[결론]28℃유도후ZmCIPK42가이유활성적단백.용His작위표첨순화ZmCIPK42단백,가고효획득대량순화단백.
