杭州师范大学学报（自然科学版）
杭州師範大學學報（自然科學版）
항주사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HANGZHOU NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2013年
1期
35-39
,共5页
虞游%张艳欧%赵文铖%白坚%陈建明
虞遊%張豔歐%趙文鋮%白堅%陳建明
우유%장염구%조문성%백견%진건명
IFII6基因%EGFP-IFI16融合蛋白%Hep-2细胞%增殖
IFII6基因%EGFP-IFI16融閤蛋白%Hep-2細胞%增殖
IFII6기인%EGFP-IFI16융합단백%Hep-2세포%증식
RT-PCR扩增的IFI16基因连接到pUCm-T载体并测序鉴定,经测序正确的IFI16基因再连接到pEGFP-C1载体构建pEGFP-IFI16重组质粒,重组质粒pEGFP-IFI16转染Hep-2细胞后用荧光显微镜及半定量RT-PCR分析其表达情况,并用流式细胞仪测定细胞生长曲线分析其表达对Hep-2细胞增殖的影响.结果显示pEGFP-IFI16重组质粒构建正确,转染Hep-2细胞后荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,半定量RT-PCR结果显示转染后Hep-2细胞IFI16基因条带亮度明显升高,细胞生长曲线测定结果显示转染后Hep-2细胞从第二天起其增殖速度变慢、至第三天时其增殖速度明显慢于对照细胞的增殖速度.说明成功构建了能在Hep-2细胞中表达EGFP-IFI16融合蛋白的pEGFP-IFI16重组质粒,pEGFP-IFI16重组质粒体表达能抑制Hep-2细胞的增殖.
RT-PCR擴增的IFI16基因連接到pUCm-T載體併測序鑒定,經測序正確的IFI16基因再連接到pEGFP-C1載體構建pEGFP-IFI16重組質粒,重組質粒pEGFP-IFI16轉染Hep-2細胞後用熒光顯微鏡及半定量RT-PCR分析其錶達情況,併用流式細胞儀測定細胞生長麯線分析其錶達對Hep-2細胞增殖的影響.結果顯示pEGFP-IFI16重組質粒構建正確,轉染Hep-2細胞後熒光顯微鏡下觀察到綠色熒光信號,半定量RT-PCR結果顯示轉染後Hep-2細胞IFI16基因條帶亮度明顯升高,細胞生長麯線測定結果顯示轉染後Hep-2細胞從第二天起其增殖速度變慢、至第三天時其增殖速度明顯慢于對照細胞的增殖速度.說明成功構建瞭能在Hep-2細胞中錶達EGFP-IFI16融閤蛋白的pEGFP-IFI16重組質粒,pEGFP-IFI16重組質粒體錶達能抑製Hep-2細胞的增殖.
RT-PCR확증적IFI16기인련접도pUCm-T재체병측서감정,경측서정학적IFI16기인재련접도pEGFP-C1재체구건pEGFP-IFI16중조질립,중조질립pEGFP-IFI16전염Hep-2세포후용형광현미경급반정량RT-PCR분석기표체정황,병용류식세포의측정세포생장곡선분석기표체대Hep-2세포증식적영향.결과현시pEGFP-IFI16중조질립구건정학,전염Hep-2세포후형광현미경하관찰도록색형광신호,반정량RT-PCR결과현시전염후Hep-2세포IFI16기인조대량도명현승고,세포생장곡선측정결과현시전염후Hep-2세포종제이천기기증식속도변만、지제삼천시기증식속도명현만우대조세포적증식속도.설명성공구건료능재Hep-2세포중표체EGFP-IFI16융합단백적pEGFP-IFI16중조질립,pEGFP-IFI16중조질립체표체능억제Hep-2세포적증식.
