中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2013年
2期
261-265
,共5页
程志安%韩凌%危建安%孙静%段晓栋
程誌安%韓凌%危建安%孫靜%段曉棟
정지안%한릉%위건안%손정%단효동
六味地黄丸%金匮肾气丸%健骨二仙丸%骨髓间充质干细胞%前脂肪细胞%成骨分化
六味地黃汍%金匱腎氣汍%健骨二仙汍%骨髓間充質榦細胞%前脂肪細胞%成骨分化
륙미지황환%금궤신기환%건골이선환%골수간충질간세포%전지방세포%성골분화
目的 研究补肾方药对大鼠骨髓间充质干细胞(B MSCs)来源的前脂肪细胞向成骨分化的影响.方法 采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,用经典化学方法诱导BMSCs为前脂肪细胞,用六味地黄丸、金匮肾气丸和健骨二仙丸含药血清(含量浓度均为10％,分别代表补肾阴、补肾阳和补肾填精方药),干预前脂肪细胞成骨分化过程；采用反转录-实时荧光定量PCR技术(RT-real time qPCR),分别于第6、12和18天,检测成骨分化相关基因RUNX2、ALP、BGP、BMP2、BMP4、SPP1和IGF1 mRNA,及成脂分化相关基因LPL、FABP4和PPARγ mRNA表达水平.结果 对于成骨分化相关基因,与对照组比较,第6天各组基因表达无显著变化(2.0 ＞Ratio ＞0.5)；第1 2天,金匮肾气丸组IGF1和RUNX2mRNA表达升高较为显著,相对表达量(Ratio)分别为2.97和1.81；第1 8天,各组IGF1 m RNA表达均显著上升,六味地黄丸组、金匮肾气丸组和健骨二仙丸组Ratio值分别为3.74、12.60和8.35；各组SPP1 mRNA表达也显著升高,Ratio值分别为2.94、3.18和2.62.对于成脂分化相关基因,第6天,六味地黄丸组和金匮肾气丸组FABP4 mRNA表达显著下降(Ratio分别为0.47和0.40),其他基因表达均下调,但不显著；第12天和第18天,成脂分化基因表达变化均无显著变化(2.0 ＞Ratio ＞0.5).结论 成骨分化相关基因在补肾方药作用较晚时间出现表达上调的变化,而成脂分化相关基因在补肾方药作用较早时间即出现表达下调的改变,并且提示补肾阳法促进成骨分化、抑制成脂分化作用更为显著.
目的 研究補腎方藥對大鼠骨髓間充質榦細胞(B MSCs)來源的前脂肪細胞嚮成骨分化的影響.方法 採用全骨髓貼壁法培養BMSCs,用經典化學方法誘導BMSCs為前脂肪細胞,用六味地黃汍、金匱腎氣汍和健骨二仙汍含藥血清(含量濃度均為10％,分彆代錶補腎陰、補腎暘和補腎填精方藥),榦預前脂肪細胞成骨分化過程；採用反轉錄-實時熒光定量PCR技術(RT-real time qPCR),分彆于第6、12和18天,檢測成骨分化相關基因RUNX2、ALP、BGP、BMP2、BMP4、SPP1和IGF1 mRNA,及成脂分化相關基因LPL、FABP4和PPARγ mRNA錶達水平.結果 對于成骨分化相關基因,與對照組比較,第6天各組基因錶達無顯著變化(2.0 ＞Ratio ＞0.5)；第1 2天,金匱腎氣汍組IGF1和RUNX2mRNA錶達升高較為顯著,相對錶達量(Ratio)分彆為2.97和1.81；第1 8天,各組IGF1 m RNA錶達均顯著上升,六味地黃汍組、金匱腎氣汍組和健骨二仙汍組Ratio值分彆為3.74、12.60和8.35；各組SPP1 mRNA錶達也顯著升高,Ratio值分彆為2.94、3.18和2.62.對于成脂分化相關基因,第6天,六味地黃汍組和金匱腎氣汍組FABP4 mRNA錶達顯著下降(Ratio分彆為0.47和0.40),其他基因錶達均下調,但不顯著；第12天和第18天,成脂分化基因錶達變化均無顯著變化(2.0 ＞Ratio ＞0.5).結論 成骨分化相關基因在補腎方藥作用較晚時間齣現錶達上調的變化,而成脂分化相關基因在補腎方藥作用較早時間即齣現錶達下調的改變,併且提示補腎暘法促進成骨分化、抑製成脂分化作用更為顯著.
목적 연구보신방약대대서골수간충질간세포(B MSCs)래원적전지방세포향성골분화적영향.방법 채용전골수첩벽법배양BMSCs,용경전화학방법유도BMSCs위전지방세포,용륙미지황환、금궤신기환화건골이선환함약혈청(함량농도균위10％,분별대표보신음、보신양화보신전정방약),간예전지방세포성골분화과정；채용반전록-실시형광정량PCR기술(RT-real time qPCR),분별우제6、12화18천,검측성골분화상관기인RUNX2、ALP、BGP、BMP2、BMP4、SPP1화IGF1 mRNA,급성지분화상관기인LPL、FABP4화PPARγ mRNA표체수평.결과 대우성골분화상관기인,여대조조비교,제6천각조기인표체무현저변화(2.0 ＞Ratio ＞0.5)；제1 2천,금궤신기환조IGF1화RUNX2mRNA표체승고교위현저,상대표체량(Ratio)분별위2.97화1.81；제1 8천,각조IGF1 m RNA표체균현저상승,륙미지황환조、금궤신기환조화건골이선환조Ratio치분별위3.74、12.60화8.35；각조SPP1 mRNA표체야현저승고,Ratio치분별위2.94、3.18화2.62.대우성지분화상관기인,제6천,륙미지황환조화금궤신기환조FABP4 mRNA표체현저하강(Ratio분별위0.47화0.40),기타기인표체균하조,단불현저；제12천화제18천,성지분화기인표체변화균무현저변화(2.0 ＞Ratio ＞0.5).결론 성골분화상관기인재보신방약작용교만시간출현표체상조적변화,이성지분화상관기인재보신방약작용교조시간즉출현표체하조적개변,병차제시보신양법촉진성골분화、억제성지분화작용경위현저.
