中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2013年
2期
214-219
,共6页
倪菲菲%刘亚军%周浩%林琳%刘增巍%沈洪%王立新
倪菲菲%劉亞軍%週浩%林琳%劉增巍%瀋洪%王立新
예비비%류아군%주호%림림%류증외%침홍%왕립신
β-榄香烯%肝癌%树突状细胞%自噬小体
β-欖香烯%肝癌%樹突狀細胞%自噬小體
β-람향희%간암%수돌상세포%자서소체
目的 观察β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗对小鼠肝癌的治疗作用,探讨β-榄香烯抗肿瘤的免疫机制.方法 制备Balb/c小鼠脾脏来源的DC并鉴定其表型,以Balb/c小鼠来源的肝癌细胞株BNL1MEA.7R.1(简称BNL)为靶细胞,募集富含肿瘤“信息”的抗原载体一自噬小体,制备DC/DRibble疫苗.预先免疫小鼠,分设对照组、β-榄香烯组、疫苗组、联合组,对照组皮下、腹腔注射PBS,β-榄香烯组和联合组连续7天腹腔注射β-榄香烯50 mg/(kg·d),疫苗组和联合组分别在第1天淋巴结注射疫苗,第3、5天皮下注射疫苗,第10天处死小鼠,无菌获得小鼠脾脏,制备悬液,分设不加刺激和Dribble刺激组,孵育72 h,ELISA法检测上清中IFN-γ的含量.另外给予联合组小鼠脾细胞不同刺激,分设对照组、DRibble组、DC组、疫苗组,孵育72 h,ELISA法检测上清中IFN-γ的含量.建立小鼠肝癌荷瘤模型,分为对照组、β-榄香烯组、疫苗组、联合组,治疗方式同上免疫方式,观察各组小鼠的肿瘤大小及生存期,第23天处死小鼠,剥取肿瘤组织经HE染色,光学显微镜观察肿瘤组织病理形态学表现.结果 体外检测发现不同方式免疫后小鼠中,联合组IFN-γ分泌量明显高于其他组(P＜0.01),β-榄香烯组、疫苗组高于对照组(P＜0.01)；给予免疫后小鼠脾细胞不同刺激,发现疫苗组、Dribble组均能刺激脾细胞分泌大量IFN-γ(P ＜0.01),当β-榄香烯刺激浓度10 μg/mL时,IFN-γ分泌明显增多(P＜0.01)；体内观察发现联合组小鼠肿瘤生长速度明显减慢,瘤表面积、生存期与其他组相比均有统计学差异(P＜0.01),肿瘤组织HE染色可见周围结缔组织包裹紧密完整,大量炎性细胞浸润.结论 β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗能够诱导特异性免疫细胞分泌细胞因子功能增强,从而发挥抗肿瘤作用,其免疫效应基础可能与增强DC抗原递呈功能有关.
目的 觀察β-欖香烯聯閤DC/DRibble疫苗對小鼠肝癌的治療作用,探討β-欖香烯抗腫瘤的免疫機製.方法 製備Balb/c小鼠脾髒來源的DC併鑒定其錶型,以Balb/c小鼠來源的肝癌細胞株BNL1MEA.7R.1(簡稱BNL)為靶細胞,募集富含腫瘤“信息”的抗原載體一自噬小體,製備DC/DRibble疫苗.預先免疫小鼠,分設對照組、β-欖香烯組、疫苗組、聯閤組,對照組皮下、腹腔註射PBS,β-欖香烯組和聯閤組連續7天腹腔註射β-欖香烯50 mg/(kg·d),疫苗組和聯閤組分彆在第1天淋巴結註射疫苗,第3、5天皮下註射疫苗,第10天處死小鼠,無菌穫得小鼠脾髒,製備懸液,分設不加刺激和Dribble刺激組,孵育72 h,ELISA法檢測上清中IFN-γ的含量.另外給予聯閤組小鼠脾細胞不同刺激,分設對照組、DRibble組、DC組、疫苗組,孵育72 h,ELISA法檢測上清中IFN-γ的含量.建立小鼠肝癌荷瘤模型,分為對照組、β-欖香烯組、疫苗組、聯閤組,治療方式同上免疫方式,觀察各組小鼠的腫瘤大小及生存期,第23天處死小鼠,剝取腫瘤組織經HE染色,光學顯微鏡觀察腫瘤組織病理形態學錶現.結果 體外檢測髮現不同方式免疫後小鼠中,聯閤組IFN-γ分泌量明顯高于其他組(P＜0.01),β-欖香烯組、疫苗組高于對照組(P＜0.01)；給予免疫後小鼠脾細胞不同刺激,髮現疫苗組、Dribble組均能刺激脾細胞分泌大量IFN-γ(P ＜0.01),噹β-欖香烯刺激濃度10 μg/mL時,IFN-γ分泌明顯增多(P＜0.01)；體內觀察髮現聯閤組小鼠腫瘤生長速度明顯減慢,瘤錶麵積、生存期與其他組相比均有統計學差異(P＜0.01),腫瘤組織HE染色可見週圍結締組織包裹緊密完整,大量炎性細胞浸潤.結論 β-欖香烯聯閤DC/DRibble疫苗能夠誘導特異性免疫細胞分泌細胞因子功能增彊,從而髮揮抗腫瘤作用,其免疫效應基礎可能與增彊DC抗原遞呈功能有關.
목적 관찰β-람향희연합DC/DRibble역묘대소서간암적치료작용,탐토β-람향희항종류적면역궤제.방법 제비Balb/c소서비장래원적DC병감정기표형,이Balb/c소서래원적간암세포주BNL1MEA.7R.1(간칭BNL)위파세포,모집부함종류“신식”적항원재체일자서소체,제비DC/DRibble역묘.예선면역소서,분설대조조、β-람향희조、역묘조、연합조,대조조피하、복강주사PBS,β-람향희조화연합조련속7천복강주사β-람향희50 mg/(kg·d),역묘조화연합조분별재제1천림파결주사역묘,제3、5천피하주사역묘,제10천처사소서,무균획득소서비장,제비현액,분설불가자격화Dribble자격조,부육72 h,ELISA법검측상청중IFN-γ적함량.령외급여연합조소서비세포불동자격,분설대조조、DRibble조、DC조、역묘조,부육72 h,ELISA법검측상청중IFN-γ적함량.건립소서간암하류모형,분위대조조、β-람향희조、역묘조、연합조,치료방식동상면역방식,관찰각조소서적종류대소급생존기,제23천처사소서,박취종류조직경HE염색,광학현미경관찰종류조직병리형태학표현.결과 체외검측발현불동방식면역후소서중,연합조IFN-γ분비량명현고우기타조(P＜0.01),β-람향희조、역묘조고우대조조(P＜0.01)；급여면역후소서비세포불동자격,발현역묘조、Dribble조균능자격비세포분비대량IFN-γ(P ＜0.01),당β-람향희자격농도10 μg/mL시,IFN-γ분비명현증다(P＜0.01)；체내관찰발현연합조소서종류생장속도명현감만,류표면적、생존기여기타조상비균유통계학차이(P＜0.01),종류조직HE염색가견주위결체조직포과긴밀완정,대량염성세포침윤.결론 β-람향희연합DC/DRibble역묘능구유도특이성면역세포분비세포인자공능증강,종이발휘항종류작용,기면역효응기출가능여증강DC항원체정공능유관.
