CAJ | 학술논문

目的:β2肾上腺素能受体(ADRB2)基因是冠心病最重要的候选基因之一,本研究探讨微小核糖核酸(miRNA)对ADRB2基因的调控及其在冠心病中的意义.方法:根据"种子区"原理预测对ADRB2具有调节作用的miRNA,按种系恒定性以及与冠心病的关系程度进一步筛选.对候选miRNA在大鼠心肌细胞H9c2(2-1)中进行增强和抑制处理,验证候选miRNA对ADRB2基因的调控.增强处理为加入相应miRNA的前体分子以提高其功能水平,抑制处理采用经化学修饰的变异体作为竞争性拮抗剂以抑制其活性水平.增强和抑制实验分别以miRNA自身序列随机化所产生的阴性分子作对照.前体或抑制剂经转染导入细胞,48 h后对ADRB2蛋白进行免疫印迹杂交分析.结果:研究结果表明,let-7i是冠心病背景下对ADRB2最具调控意义的miRNA之一.ANOVA统计分析显示,以let-7i增强剂处理心肌细胞48 h后使ADRB2蛋白水平降低了61.83%(P=0.0012),同时,以let-7i拮抗剂处理心肌细胞 48 h导致ADRB2蛋白水平升高了48.49%(P=0.0071).结论:let-7i对心肌细胞ADRB2水平具有显著的调节作用,并与之呈负相关,研究提示ADRB2的miRNA调控机制在冠心病病因学及治疗学中具有重要意义.
목적:β2신상선소능수체(ADRB2)기인시관심병최중요적후선기인지일,본연구탐토미소핵당핵산(miRNA)대ADRB2기인적조공급기재관심병중적의의.방법:근거"충자구"원리예측대ADRB2구유조절작용적miRNA,안충계항정성이급여관심병적관계정도진일보사선.대후선miRNA재대서심기세포H9c2(2-1)중진행증강화억제처리,험증후선miRNA대ADRB2기인적조공.증강처리위가입상응miRNA적전체분자이제고기공능수평,억제처리채용경화학수식적변이체작위경쟁성길항제이억제기활성수평.증강화억제실험분별이miRNA자신서렬수궤화소산생적음성분자작대조.전체혹억제제경전염도입세포,48 h후대ADRB2단백진행면역인적잡교분석.결과:연구결과표명,let-7i시관심병배경하대ADRB2최구조공의의적miRNA지일.ANOVA통계분석현시,이let-7i증강제처리심기세포48 h후사ADRB2단백수평강저료61.83%(P=0.0012),동시,이let-7i길항제처리심기세포 48 h도치ADRB2단백수평승고료48.49%(P=0.0071).결론:let-7i대심기세포ADRB2수평구유현저적조절작용,병여지정부상관,연구제시ADRB2적miRNA조공궤제재관심병병인학급치료학중구유중요의의.