中国中西医结合肾病杂志
中國中西醫結閤腎病雜誌
중국중서의결합신병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN NEPHROLOGY
2013年
2期
148-150
,共3页
邓文艳%马健飞%樊怡%杨丽娜%孙立霞
鄧文豔%馬健飛%樊怡%楊麗娜%孫立霞
산문염%마건비%번이%양려나%손립하
腹膜间皮细胞%脂多糖%ERK1/2%结缔组织生长因子%MG132
腹膜間皮細胞%脂多糖%ERK1/2%結締組織生長因子%MG132
복막간피세포%지다당%ERK1/2%결체조직생장인자%MG132
目的:观察在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway,UPP)对大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响,并以蛋白酶体抑制剂MG132为阻断剂,探讨该途径在腹膜纤维化中的作用.方法:胰蛋白酶消化法原代和传代培养RPMC,经鉴定后第2代用于实验.按数字随机表法分为:(1)正常对照组;(2)LPS组:不同浓度LPS(1、10、100 μg/ml)作用24 h,10 μg/ml LPS分别作用于RPMC 0 h、12 h、24 h、48 h;(3)药物组:MG132 0.5,1,2 μmol/L预孵30 min后加10 μg/ml LPS作用24 h.Western印迹测ERK1/2蛋白的表达.ELISA法检测细胞培养上清液中CTGF的含量.结果:与正常对照组相比,LPS可刺激RPMC p-ERK1/2蛋白的表达增高,24 h是表达高峰(P<0.01),48 h表达量降低,但仍高于正常组(P<0.01);t-ERK1/2各组表达差异无统计学意义.LPS诱导RPMC CTGF蛋白的表达增高,且呈现时间、剂量依赖性(P<0.05).MG132能显著降低LPS所致的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达(P<0.05).结论:MG132可降低由LPS诱导的腹膜间皮细胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的表达,提示泛素蛋白酶体途径参与了腹膜间皮细胞的纤维化发展,阻断该途径有利于防治腹膜纤维化.
目的:觀察在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,汎素蛋白酶體途徑(ubiquitin proteasome pathway,UPP)對大鼠腹膜間皮細胞(RPMC)細胞外信號調節激酶1/2(ERK1/2)、結締組織生長因子(CTGF)蛋白錶達的影響,併以蛋白酶體抑製劑MG132為阻斷劑,探討該途徑在腹膜纖維化中的作用.方法:胰蛋白酶消化法原代和傳代培養RPMC,經鑒定後第2代用于實驗.按數字隨機錶法分為:(1)正常對照組;(2)LPS組:不同濃度LPS(1、10、100 μg/ml)作用24 h,10 μg/ml LPS分彆作用于RPMC 0 h、12 h、24 h、48 h;(3)藥物組:MG132 0.5,1,2 μmol/L預孵30 min後加10 μg/ml LPS作用24 h.Western印跡測ERK1/2蛋白的錶達.ELISA法檢測細胞培養上清液中CTGF的含量.結果:與正常對照組相比,LPS可刺激RPMC p-ERK1/2蛋白的錶達增高,24 h是錶達高峰(P<0.01),48 h錶達量降低,但仍高于正常組(P<0.01);t-ERK1/2各組錶達差異無統計學意義.LPS誘導RPMC CTGF蛋白的錶達增高,且呈現時間、劑量依賴性(P<0.05).MG132能顯著降低LPS所緻的腹膜間皮細胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的錶達(P<0.05).結論:MG132可降低由LPS誘導的腹膜間皮細胞p-ERK1/2、CTGF蛋白的錶達,提示汎素蛋白酶體途徑參與瞭腹膜間皮細胞的纖維化髮展,阻斷該途徑有利于防治腹膜纖維化.
목적:관찰재지다당(lipopolysaccharide,LPS)자격하,범소단백매체도경(ubiquitin proteasome pathway,UPP)대대서복막간피세포(RPMC)세포외신호조절격매1/2(ERK1/2)、결체조직생장인자(CTGF)단백표체적영향,병이단백매체억제제MG132위조단제,탐토해도경재복막섬유화중적작용.방법:이단백매소화법원대화전대배양RPMC,경감정후제2대용우실험.안수자수궤표법분위:(1)정상대조조;(2)LPS조:불동농도LPS(1、10、100 μg/ml)작용24 h,10 μg/ml LPS분별작용우RPMC 0 h、12 h、24 h、48 h;(3)약물조:MG132 0.5,1,2 μmol/L예부30 min후가10 μg/ml LPS작용24 h.Western인적측ERK1/2단백적표체.ELISA법검측세포배양상청액중CTGF적함량.결과:여정상대조조상비,LPS가자격RPMC p-ERK1/2단백적표체증고,24 h시표체고봉(P<0.01),48 h표체량강저,단잉고우정상조(P<0.01);t-ERK1/2각조표체차이무통계학의의.LPS유도RPMC CTGF단백적표체증고,차정현시간、제량의뢰성(P<0.05).MG132능현저강저LPS소치적복막간피세포p-ERK1/2、CTGF단백적표체(P<0.05).결론:MG132가강저유LPS유도적복막간피세포p-ERK1/2、CTGF단백적표체,제시범소단백매체도경삼여료복막간피세포적섬유화발전,조단해도경유리우방치복막섬유화.
