癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2013年
2期
87-90,95
,共5页
DENND2D%PARP1%顺铂%非小细胞肺癌%细胞毒性
DENND2D%PARP1%順鉑%非小細胞肺癌%細胞毒性
DENND2D%PARP1%순박%비소세포폐암%세포독성
目的:检测肺癌细胞系H1299细胞中DENN/MADD domain containing 2D (DENND2D)基因过表达对顺铂细胞毒性的影响,并初步探讨其机制.方法:应用瞬时和稳定转染两种方法使H1299细胞外源过表达DENND2D基因,以空载体组作为对照组,应用CCK-8比色法检测不同浓度顺铂作用下H1299细胞的存活情况,据此计算出IC 值.利用Western blot方法检测外源过表达50DENND2D的H1299细胞多聚ADP核糖聚合酶 [poly (ADP-ribose) polymerase-1,PARP1]的表达情况.利用顺铂处理外源过表达DENND2D的H1299细胞,并检测不同处理时间点 (0、1、2、4和8 h)H1299细胞多聚ADP核糖[poly (ADP-ribose),PAR]的表达情况.结果:顺铂对外源过表达DENND2D基因的H1299细胞毒性明显高于空载体组 (IC 值降低,P＜0.05).外源过表达DENND2D的50H1299细胞PARP1蛋白和PAR蛋白的表达均比空载体对照组低,且空载体对照组PAR的表达随时间推移呈上升趋势,而外源过表达DENND2D组则呈下降趋势.结论:DENND2D可能通过对PARP1的调控增强了顺铂对肺癌细胞系H1299的细胞毒性.
目的:檢測肺癌細胞繫H1299細胞中DENN/MADD domain containing 2D (DENND2D)基因過錶達對順鉑細胞毒性的影響,併初步探討其機製.方法:應用瞬時和穩定轉染兩種方法使H1299細胞外源過錶達DENND2D基因,以空載體組作為對照組,應用CCK-8比色法檢測不同濃度順鉑作用下H1299細胞的存活情況,據此計算齣IC 值.利用Western blot方法檢測外源過錶達50DENND2D的H1299細胞多聚ADP覈糖聚閤酶 [poly (ADP-ribose) polymerase-1,PARP1]的錶達情況.利用順鉑處理外源過錶達DENND2D的H1299細胞,併檢測不同處理時間點 (0、1、2、4和8 h)H1299細胞多聚ADP覈糖[poly (ADP-ribose),PAR]的錶達情況.結果:順鉑對外源過錶達DENND2D基因的H1299細胞毒性明顯高于空載體組 (IC 值降低,P＜0.05).外源過錶達DENND2D的50H1299細胞PARP1蛋白和PAR蛋白的錶達均比空載體對照組低,且空載體對照組PAR的錶達隨時間推移呈上升趨勢,而外源過錶達DENND2D組則呈下降趨勢.結論:DENND2D可能通過對PARP1的調控增彊瞭順鉑對肺癌細胞繫H1299的細胞毒性.
목적:검측폐암세포계H1299세포중DENN/MADD domain containing 2D (DENND2D)기인과표체대순박세포독성적영향,병초보탐토기궤제.방법:응용순시화은정전염량충방법사H1299세포외원과표체DENND2D기인,이공재체조작위대조조,응용CCK-8비색법검측불동농도순박작용하H1299세포적존활정황,거차계산출IC 치.이용Western blot방법검측외원과표체50DENND2D적H1299세포다취ADP핵당취합매 [poly (ADP-ribose) polymerase-1,PARP1]적표체정황.이용순박처리외원과표체DENND2D적H1299세포,병검측불동처리시간점 (0、1、2、4화8 h)H1299세포다취ADP핵당[poly (ADP-ribose),PAR]적표체정황.결과:순박대외원과표체DENND2D기인적H1299세포독성명현고우공재체조 (IC 치강저,P＜0.05).외원과표체DENND2D적50H1299세포PARP1단백화PAR단백적표체균비공재체대조조저,차공재체대조조PAR적표체수시간추이정상승추세,이외원과표체DENND2D조칙정하강추세.결론:DENND2D가능통과대PARP1적조공증강료순박대폐암세포계H1299적세포독성.
