中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
3期
342-346
,共5页
潘雪刁%何冰%王桂香%刘金泳%曹成明%臧林泉
潘雪刁%何冰%王桂香%劉金泳%曹成明%臧林泉
반설조%하빙%왕계향%류금영%조성명%장림천
肺癌%噬菌体展示技术%多肽%减性筛选%NCI-H1299细胞%肽库
肺癌%噬菌體展示技術%多肽%減性篩選%NCI-H1299細胞%肽庫
폐암%서균체전시기술%다태%감성사선%NCI-H1299세포%태고
目的 应用噬菌体随机肽库技术筛选出与肺癌细胞特异性结合的多肽.方法 以人肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,人胚肺细胞MRC-5为吸附细胞,对噬菌体随机12肽库进行3轮全细胞减性筛选后,随机挑取噬菌体克隆进行ELISA鉴定;对亲和力较高的阳性克隆进行DNA测序并翻译为氨基酸序列;化学合成异硫氰酸荧光素标记的多肽(FITC-ZS-5),采用细胞和组织免疫荧光法鉴定FITC-ZS-5与肺癌细胞的亲和力及特异性.结果 通过3轮减性筛选后,与NCI-H1299细胞结合的噬菌体克隆得到有效的富集:ELISA结果显示5号克隆对CI-H1299细胞亲和力最高,将其命名为Phage ZS-5:测序结果显示Phage ZS-5所表达的多肽序列在国内外均未见报道,细胞及组织免疫荧光实验结果显示FITC-ZS-5 对肺癌细胞及组织具有较高的亲和力和特异性.结论 应用噬菌体随机肽库技术筛选到肺癌靶向性多肽ZS-5,为肺癌的靶向治疗和诊断奠定基础.
目的 應用噬菌體隨機肽庫技術篩選齣與肺癌細胞特異性結閤的多肽.方法 以人肺癌細胞NCI-H1299為靶細胞,人胚肺細胞MRC-5為吸附細胞,對噬菌體隨機12肽庫進行3輪全細胞減性篩選後,隨機挑取噬菌體剋隆進行ELISA鑒定;對親和力較高的暘性剋隆進行DNA測序併翻譯為氨基痠序列;化學閤成異硫氰痠熒光素標記的多肽(FITC-ZS-5),採用細胞和組織免疫熒光法鑒定FITC-ZS-5與肺癌細胞的親和力及特異性.結果 通過3輪減性篩選後,與NCI-H1299細胞結閤的噬菌體剋隆得到有效的富集:ELISA結果顯示5號剋隆對CI-H1299細胞親和力最高,將其命名為Phage ZS-5:測序結果顯示Phage ZS-5所錶達的多肽序列在國內外均未見報道,細胞及組織免疫熒光實驗結果顯示FITC-ZS-5 對肺癌細胞及組織具有較高的親和力和特異性.結論 應用噬菌體隨機肽庫技術篩選到肺癌靶嚮性多肽ZS-5,為肺癌的靶嚮治療和診斷奠定基礎.
목적 응용서균체수궤태고기술사선출여폐암세포특이성결합적다태.방법 이인폐암세포NCI-H1299위파세포,인배폐세포MRC-5위흡부세포,대서균체수궤12태고진행3륜전세포감성사선후,수궤도취서균체극륭진행ELISA감정;대친화력교고적양성극륭진행DNA측서병번역위안기산서렬;화학합성이류청산형광소표기적다태(FITC-ZS-5),채용세포화조직면역형광법감정FITC-ZS-5여폐암세포적친화력급특이성.결과 통과3륜감성사선후,여NCI-H1299세포결합적서균체극륭득도유효적부집:ELISA결과현시5호극륭대CI-H1299세포친화력최고,장기명명위Phage ZS-5:측서결과현시Phage ZS-5소표체적다태서렬재국내외균미견보도,세포급조직면역형광실험결과현시FITC-ZS-5 대폐암세포급조직구유교고적친화력화특이성.결론 응용서균체수궤태고기술사선도폐암파향성다태ZS-5,위폐암적파향치료화진단전정기출.
