CAJ | 학술논문

目的:探讨以人胶质纤维酸性蛋白(hGfap)基因启动子介导的Cre 重组酶在小鼠小脑中的表达.方法:将hGfapcre 转基因小鼠与Rosa26R 转基因鼠杂交得到hGfapcre/Rosa26R 基因型小鼠,分别在胚胎12.5 、13.5 、14.5 、16.5d 和出生后3 周,取小脑组织切片行X-gal 染色观察Cre 重组酶分布;另外,出生后3 周的小脑组织切片同时使用细胞种类特异性抗体Blbp(星形胶质细胞标记物)、NeuN(颗粒细胞标记物)、Calbindin(浦肯野细胞标记物)进行免疫组织化学染色鉴定X-gal 染色阳性细胞类型.结果:胚胎13.5d,小脑菱唇开始出现X-gal 染色阳性细胞;此后Cre 重组酶表达范围进一步扩大,至胚胎16.5d,X-gal 染色阳性细胞可覆盖整个小脑;在出生后3 周,X-gal 染色阳性细胞可以和Blbp 及NeuN 共标记,和Cal-bindin 不能共标记.结论:以hGfap 基因启动子介导的Cre 重组酶最早在胚胎13.5d 的菱唇开始表达,并且Cre 重组酶主要表达于星形胶质细胞(包括Bergmann 胶质细胞)和颗粒细胞,不表达于浦肯野细胞,表明在小脑发育过程中以GFAP 为标记物的胶质细胞主要向星形胶质细胞(包括Bergmann 胶质细胞)和颗粒细胞分化,不向浦肯野细胞分化.
목적:탐토이인효질섬유산성단백(hGfap)기인계동자개도적Cre 중조매재소서소뇌중적표체.방법:장hGfapcre 전기인소서여Rosa26R 전기인서잡교득도hGfapcre/Rosa26R 기인형소서,분별재배태12.5 、13.5 、14.5 、16.5d 화출생후3 주,취소뇌조직절편행X-gal 염색관찰Cre 중조매분포;령외,출생후3 주적소뇌조직절편동시사용세포충류특이성항체Blbp(성형효질세포표기물)、NeuN(과립세포표기물)、Calbindin(포긍야세포표기물)진행면역조직화학염색감정X-gal 염색양성세포류형.결과:배태13.5d,소뇌릉진개시출현X-gal 염색양성세포;차후Cre 중조매표체범위진일보확대,지배태16.5d,X-gal 염색양성세포가복개정개소뇌;재출생후3 주,X-gal 염색양성세포가이화Blbp 급NeuN 공표기,화Cal-bindin 불능공표기.결론:이hGfap 기인계동자개도적Cre 중조매최조재배태13.5d 적릉진개시표체,병차Cre 중조매주요표체우성형효질세포(포괄Bergmann 효질세포)화과립세포,불표체우포긍야세포,표명재소뇌발육과정중이GFAP 위표기물적효질세포주요향성형효질세포(포괄Bergmann 효질세포)화과립세포분화,불향포긍야세포분화.