CAJ | 학술논문

目的采用聚氧乙烯辛烷基酚(Triton X-100)去除异体周围神经中的雪旺细胞和髓鞘,制取天然神经细胞外基质的超微结构.方法健康新西兰大耳白兔30只,分别自梨状肌下缘水平以远切取10 mm双侧坐骨神经60根,随机分为六组,其中12h组、24 h组、48 h组、96 h组、1 w组用于化学萃取,新鲜神经为对照组.神经萃取前先在手术显微镜下剪去表面的脂肪组织和部分神经外膜,然后置4℃蒸馏水中静置6h,以使细胞和髓鞘在低渗液体中膨胀、细胞被胀破,使之易于Triton X-100的渗透；再将神经放人3％的Triton X-100水溶液中分别静置12h,然后置于蒸馏水中震荡、漂洗6h,以使溶于水的Triton X-100膜蛋白复合体充分脱离神经干.如此反复,并且每次更换蒸馏水、Triton X-100水溶液.五组神经TritonX-100萃取时间分别为12h、24 h、48 h、96 h、1 w.在新鲜神经和萃取后的神经中段分别切取一段神经,2.5％戊二醛固定后,制成扫描电镜标本,用日立S-3500N型扫描电镜观察神经的立体结构并采集图像.结果扫描电镜下观察,随着萃取时间的延长,神经内的轴突、髓鞘逐渐减少,少于96 h时仍可见有轴突、髓鞘的残留.萃取时间至96 h时神经内的轴突、髓鞘已被完全去除,可见由胶原纤维构成的立体管状结构,胶原纤维仍维持原有的位置、形态及结构特征,管内并可见膜样结构,为雪旺细胞基底膜.萃取时间为1 w的标本扫描电镜下观察,由胶原纤维构成的立体管状结构与96 h的标本相似,但结构较之稍散乱,形成的管腔不规则.结论用Triton X-100化学萃取方法是制备组织工程化神经移植体的有效方法.萃取人类长段粗大神经时,为使雪旺细胞、轴突、髓鞘去除完全,可适当延长萃取时间.
목적 채용취양을희신완기분(Triton X-100)거제이체주위신경중적설왕세포화수초,제취천연신경세포외기질적초미결구.방법 건강신서란대이백토30지,분별자리상기하연수평이원절취10 mm쌍측좌골신경60근,수궤분위륙조,기중12h조、24 h조、48 h조、96 h조、1 w조용우화학췌취,신선신경위대조조.신경췌취전선재수술현미경하전거표면적지방조직화부분신경외막,연후치4℃증류수중정치6h,이사세포화수초재저삼액체중팽창、세포피창파,사지역우Triton X-100적삼투；재장신경방인3％적Triton X-100수용액중분별정치12h,연후치우증류수중진탕、표세6h,이사용우수적Triton X-100막단백복합체충분탈리신경간.여차반복,병차매차경환증류수、Triton X-100수용액.오조신경TritonX-100췌취시간분별위12h、24 h、48 h、96 h、1 w.재신선신경화췌취후적신경중단분별절취일단신경,2.5％무이철고정후,제성소묘전경표본,용일립S-3500N형소묘전경관찰신경적입체결구병채집도상.결과 소묘전경하관찰,수착췌취시간적연장,신경내적축돌、수초축점감소,소우96 h시잉가견유축돌、수초적잔류.췌취시간지96 h시신경내적축돌、수초이피완전거제,가견유효원섬유구성적입체관상결구,효원섬유잉유지원유적위치、형태급결구특정,관내병가견막양결구,위설왕세포기저막.췌취시간위1 w적표본소묘전경하관찰,유효원섬유구성적입체관상결구여96 h적표본상사,단결구교지초산란,형성적관강불규칙.결론 용Triton X-100화학췌취방법시제비조직공정화신경이식체적유효방법.췌취인류장단조대신경시,위사설왕세포、축돌、수초거제완전,가괄당연장췌취시간.