厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2013年
2期
237-243
,共7页
董艳美%张国广%汪卫%范红军%陈亮
董豔美%張國廣%汪衛%範紅軍%陳亮
동염미%장국엄%왕위%범홍군%진량
口蹄疫%MS2噬菌体%抗原决定簇%类病毒颗粒
口蹄疫%MS2噬菌體%抗原決定簇%類病毒顆粒
구제역%MS2서균체%항원결정족%류병독과립
研究表明,口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的VP1蛋白含有关键的抗原决定簇.根据O/HL-JOC12/03猪源FMDV毒株VP1上第141～160位氨基酸序列设计引物,利用重叠延伸PCR(SOE PCR)技术将该序列插入在大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体MS2外壳蛋白基因的特定位点.然后连接到原核表达载体pET28a上,构建了重组表达质粒28a-CP-VP1,转化BL21 (DE3),ITPG诱导表达得到融合表达的CP-VP1.透射电子显微镜下观察融合蛋白CP-VP1成类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)状.间接ELISA实验证实该蛋白能够特异地结合豚鼠抗O型FM-DV的阳性血清,30 μg的CP-VP1的VLPs蛋白免疫小鼠后可以诱导其产生高效价的特异抗体.故该口蹄疫病毒抗原决定簇展示在噬菌体MS2上表面的VLPs蛋白具有开发成口蹄疫疫苗的前景.
研究錶明,口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的VP1蛋白含有關鍵的抗原決定簇.根據O/HL-JOC12/03豬源FMDV毒株VP1上第141～160位氨基痠序列設計引物,利用重疊延伸PCR(SOE PCR)技術將該序列插入在大腸桿菌(Escherichia coli)噬菌體MS2外殼蛋白基因的特定位點.然後連接到原覈錶達載體pET28a上,構建瞭重組錶達質粒28a-CP-VP1,轉化BL21 (DE3),ITPG誘導錶達得到融閤錶達的CP-VP1.透射電子顯微鏡下觀察融閤蛋白CP-VP1成類病毒顆粒(virus-like particles,VLPs)狀.間接ELISA實驗證實該蛋白能夠特異地結閤豚鼠抗O型FM-DV的暘性血清,30 μg的CP-VP1的VLPs蛋白免疫小鼠後可以誘導其產生高效價的特異抗體.故該口蹄疫病毒抗原決定簇展示在噬菌體MS2上錶麵的VLPs蛋白具有開髮成口蹄疫疫苗的前景.
연구표명,구제역병독(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)적VP1단백함유관건적항원결정족.근거O/HL-JOC12/03저원FMDV독주VP1상제141～160위안기산서렬설계인물,이용중첩연신PCR(SOE PCR)기술장해서렬삽입재대장간균(Escherichia coli)서균체MS2외각단백기인적특정위점.연후련접도원핵표체재체pET28a상,구건료중조표체질립28a-CP-VP1,전화BL21 (DE3),ITPG유도표체득도융합표체적CP-VP1.투사전자현미경하관찰융합단백CP-VP1성류병독과립(virus-like particles,VLPs)상.간접ELISA실험증실해단백능구특이지결합돈서항O형FM-DV적양성혈청,30 μg적CP-VP1적VLPs단백면역소서후가이유도기산생고효개적특이항체.고해구제역병독항원결정족전시재서균체MS2상표면적VLPs단백구유개발성구제역역묘적전경.
