新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
2期
313-318
,共6页
拟步甲科昆虫%RNA提取%TRIzol法%小胸鳖甲
擬步甲科昆蟲%RNA提取%TRIzol法%小胸鱉甲
의보갑과곤충%RNA제취%TRIzol법%소흉별갑
[目的]获得高质量的总RNA是开展分子生物学研究的重要一步,由于不同生物的机体组成成分有较大差异,需要针对不同类型的物种建立各自有效的RNA提取方法.鞘翅目昆虫富含几丁质的外壳,常规方法难以获得高质量的RNA.[方法]以鞘翅目拟步甲科昆虫小胸鳖甲(Microdera punctipennis)为例,采用TRIzol试剂提取分离总RNA,方法略有改进,并对总RNA的电泳谱带特征进行鉴定.[结果]利用该方法从小胸鳖甲成虫中所获得的总RNA纯度较高完整性好,进一步实验证明提取的总RNA可满足RT-PCR等多种后续实验.琼脂糖凝胶电泳分析表明,其总RNA电泳谱带主要以18S带为主,28S则很弱.[结论]该提取方法对其他荒漠拟步甲科昆虫,尤其是含几丁质外壳的甲虫总RNA提取具有指导作用,小胸鳖甲总RAN的电泳谱带与哺乳动物肿瘤细胞的不同.
[目的]穫得高質量的總RNA是開展分子生物學研究的重要一步,由于不同生物的機體組成成分有較大差異,需要針對不同類型的物種建立各自有效的RNA提取方法.鞘翅目昆蟲富含幾丁質的外殼,常規方法難以穫得高質量的RNA.[方法]以鞘翅目擬步甲科昆蟲小胸鱉甲(Microdera punctipennis)為例,採用TRIzol試劑提取分離總RNA,方法略有改進,併對總RNA的電泳譜帶特徵進行鑒定.[結果]利用該方法從小胸鱉甲成蟲中所穫得的總RNA純度較高完整性好,進一步實驗證明提取的總RNA可滿足RT-PCR等多種後續實驗.瓊脂糖凝膠電泳分析錶明,其總RNA電泳譜帶主要以18S帶為主,28S則很弱.[結論]該提取方法對其他荒漠擬步甲科昆蟲,尤其是含幾丁質外殼的甲蟲總RNA提取具有指導作用,小胸鱉甲總RAN的電泳譜帶與哺乳動物腫瘤細胞的不同.
[목적]획득고질량적총RNA시개전분자생물학연구적중요일보,유우불동생물적궤체조성성분유교대차이,수요침대불동류형적물충건립각자유효적RNA제취방법.초시목곤충부함궤정질적외각,상규방법난이획득고질량적RNA.[방법]이초시목의보갑과곤충소흉별갑(Microdera punctipennis)위례,채용TRIzol시제제취분리총RNA,방법략유개진,병대총RNA적전영보대특정진행감정.[결과]이용해방법종소흉별갑성충중소획득적총RNA순도교고완정성호,진일보실험증명제취적총RNA가만족RT-PCR등다충후속실험.경지당응효전영분석표명,기총RNA전영보대주요이18S대위주,28S칙흔약.[결론]해제취방법대기타황막의보갑과곤충,우기시함궤정질외각적갑충총RNA제취구유지도작용,소흉별갑총RAN적전영보대여포유동물종류세포적불동.