新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
2期
300-306
,共7页
王燕%李婷婷%李阳%吴婷%王梦竹%刘东亮%孙素荣
王燕%李婷婷%李暘%吳婷%王夢竹%劉東亮%孫素榮
왕연%리정정%리양%오정%왕몽죽%류동량%손소영
苦豆子凝集素基因%载体构建%烟草%转化
苦豆子凝集素基因%載體構建%煙草%轉化
고두자응집소기인%재체구건%연초%전화
[目的]了解苦豆子凝集素基因(SAL)的功能,将该基因构建到植物表达载体并转化烟草,获得转基因植株.[方法]利用RT-PCR技术,提取苦豆子总RNA进行反转录得到cDNA,通过PCR扩增得到苦豆子凝集素基因SAL,并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA1301上,产生重组质粒pCAMBIA1301-SAL.采用农杆菌介导法将重组质粒转化烟草,并进行分析鉴定.[结果]构建了植物表达载体pCAMBIA1301-SAL,转化烟草后经筛选获得76株转基因植株,经抗性筛选及PCR和RT-PCR鉴定,其中27株显示为阳性植株.[结论]苦豆子凝集素基因已经在烟草中成功表达,为进一步研究验证转基因烟草的抗病效果奠定了基础.
[目的]瞭解苦豆子凝集素基因(SAL)的功能,將該基因構建到植物錶達載體併轉化煙草,穫得轉基因植株.[方法]利用RT-PCR技術,提取苦豆子總RNA進行反轉錄得到cDNA,通過PCR擴增得到苦豆子凝集素基因SAL,併將其剋隆到植物錶達載體pCAMBIA1301上,產生重組質粒pCAMBIA1301-SAL.採用農桿菌介導法將重組質粒轉化煙草,併進行分析鑒定.[結果]構建瞭植物錶達載體pCAMBIA1301-SAL,轉化煙草後經篩選穫得76株轉基因植株,經抗性篩選及PCR和RT-PCR鑒定,其中27株顯示為暘性植株.[結論]苦豆子凝集素基因已經在煙草中成功錶達,為進一步研究驗證轉基因煙草的抗病效果奠定瞭基礎.
[목적]료해고두자응집소기인(SAL)적공능,장해기인구건도식물표체재체병전화연초,획득전기인식주.[방법]이용RT-PCR기술,제취고두자총RNA진행반전록득도cDNA,통과PCR확증득도고두자응집소기인SAL,병장기극륭도식물표체재체pCAMBIA1301상,산생중조질립pCAMBIA1301-SAL.채용농간균개도법장중조질립전화연초,병진행분석감정.[결과]구건료식물표체재체pCAMBIA1301-SAL,전화연초후경사선획득76주전기인식주,경항성사선급PCR화RT-PCR감정,기중27주현시위양성식주.[결론]고두자응집소기인이경재연초중성공표체,위진일보연구험증전기인연초적항병효과전정료기출.
