医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2013年
3期
120-123
,共4页
蛋白激酶C α%肿瘤坏死因子α%肝肾综合征%肾小球系膜细胞%1,4,5-三磷酸肌醇受体
蛋白激酶C α%腫瘤壞死因子α%肝腎綜閤徵%腎小毬繫膜細胞%1,4,5-三燐痠肌醇受體
단백격매C α%종류배사인자α%간신종합정%신소구계막세포%1,4,5-삼린산기순수체
目的 研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肾小球系膜细胞蛋白激酶Cα(PKC-α)活性的影响,揭示TNF-α引起肝肾综合征肾小球滤过率(GFR)下降的机制.方法 选择大鼠系膜细胞株进行体外培养.按TNF-α处理的不同时间点(0、4、8、24h)分4组.分别应用Western blot、免疫荧光、免疫电镜及PKC-α活性定量检测方法,观察TNF-α对PKC-α表达量及活性的影响.结果 TNF-α处理组PKC-α蛋白表达与对照组比较无统计学差异(4h:0.75±0.13； 8h:0.76±0.12；24h:0.78±0.10,vs0h:0.84±0.11,P＞0.05).免疫荧光及免疫电镜发现:对照组PKC-α在胞质中呈弥漫性分布,核内无表达.TNF-α处理8、24h组PKC-α存在明显核周聚集,胞核内也可见少量PKC-α表达,以TNF-α处理8时最明显.PKC活性定量检测TNF-α处理8、24h组PKC-α活性明显增强(4h:1.11±0.96,P=0.612；8h:1.87±0.25,P=0.000；24h:1.68±0.14,P=0.000 vs 0h:1.07±0.06),以TNF-α处理8h组最明显(P =0.017 vs 24h).结论 TNF-α对GMCs中的PKC-α蛋白表达量无影响,却能明显增加其PKC-α活性,后者可能是TNF-α引起GFR下降的重要信号.
目的 研究腫瘤壞死因子α(TNF-α)對腎小毬繫膜細胞蛋白激酶Cα(PKC-α)活性的影響,揭示TNF-α引起肝腎綜閤徵腎小毬濾過率(GFR)下降的機製.方法 選擇大鼠繫膜細胞株進行體外培養.按TNF-α處理的不同時間點(0、4、8、24h)分4組.分彆應用Western blot、免疫熒光、免疫電鏡及PKC-α活性定量檢測方法,觀察TNF-α對PKC-α錶達量及活性的影響.結果 TNF-α處理組PKC-α蛋白錶達與對照組比較無統計學差異(4h:0.75±0.13； 8h:0.76±0.12；24h:0.78±0.10,vs0h:0.84±0.11,P＞0.05).免疫熒光及免疫電鏡髮現:對照組PKC-α在胞質中呈瀰漫性分佈,覈內無錶達.TNF-α處理8、24h組PKC-α存在明顯覈週聚集,胞覈內也可見少量PKC-α錶達,以TNF-α處理8時最明顯.PKC活性定量檢測TNF-α處理8、24h組PKC-α活性明顯增彊(4h:1.11±0.96,P=0.612；8h:1.87±0.25,P=0.000；24h:1.68±0.14,P=0.000 vs 0h:1.07±0.06),以TNF-α處理8h組最明顯(P =0.017 vs 24h).結論 TNF-α對GMCs中的PKC-α蛋白錶達量無影響,卻能明顯增加其PKC-α活性,後者可能是TNF-α引起GFR下降的重要信號.
목적 연구종류배사인자α(TNF-α)대신소구계막세포단백격매Cα(PKC-α)활성적영향,게시TNF-α인기간신종합정신소구려과솔(GFR)하강적궤제.방법 선택대서계막세포주진행체외배양.안TNF-α처리적불동시간점(0、4、8、24h)분4조.분별응용Western blot、면역형광、면역전경급PKC-α활성정량검측방법,관찰TNF-α대PKC-α표체량급활성적영향.결과 TNF-α처리조PKC-α단백표체여대조조비교무통계학차이(4h:0.75±0.13； 8h:0.76±0.12；24h:0.78±0.10,vs0h:0.84±0.11,P＞0.05).면역형광급면역전경발현:대조조PKC-α재포질중정미만성분포,핵내무표체.TNF-α처리8、24h조PKC-α존재명현핵주취집,포핵내야가견소량PKC-α표체,이TNF-α처리8시최명현.PKC활성정량검측TNF-α처리8、24h조PKC-α활성명현증강(4h:1.11±0.96,P=0.612；8h:1.87±0.25,P=0.000；24h:1.68±0.14,P=0.000 vs 0h:1.07±0.06),이TNF-α처리8h조최명현(P =0.017 vs 24h).결론 TNF-α대GMCs중적PKC-α단백표체량무영향,각능명현증가기PKC-α활성,후자가능시TNF-α인기GFR하강적중요신호.
