实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2013年
3期
350-353
,共4页
胡勉娟%曾庆仁%粟占三%兰智华%贺美%余权%张祖萍%蔡力汀
鬍勉娟%曾慶仁%粟佔三%蘭智華%賀美%餘權%張祖萍%蔡力汀
호면연%증경인%속점삼%란지화%하미%여권%장조평%채력정
蠕虫%石蜡切片%蛋白酶K消化法%DNA提取%聚合酶链反应
蠕蟲%石蠟切片%蛋白酶K消化法%DNA提取%聚閤酶鏈反應
연충%석사절편%단백매K소화법%DNA제취%취합매련반응
目的 建立一种实用于临床病理鉴别诊断组织切片内蠕虫虫种的分子病理学方法. 方法 制作已知的和从临床收集的多种蠕虫和宿主组织病理切片标本,用改良蛋白K消化法对各种蠕虫切片的白片、HE染色片和免疫组化片组织提取DNA;设计合成检测并殖吸虫、曼氏裂头蚴和猪囊虫各自特异性基因片段的引物,分别对各DNA提取物作PCR扩增,经凝胶电泳观察目的基因片段；比较分析三种蠕虫各自最小组织量检测的敏感性和特异性. 结果 对三种蠕虫所选用的引物均可扩增出清晰的特异性目的条带.用改良蛋白K消化法提取蠕虫DNA可PCR扩增出目的片段的敏感性均优于商品化试剂盒提取法,可提出DNA的最小组织面及厚度为:肺吸虫的为1.50 mm2,10μm;曼氏裂头蚴的为4.87 mm2,5μm;猪囊虫的为5.80 mm2,5μm.经10个临床标本检测均获得理想结果. 结论 本研究成功地探索出一种对病理切片中微量组织提取DNA作PCR鉴定虫种的简便方法,为病理诊断提供了进一步鉴别此3种蠕虫的分子病理学手段.
目的 建立一種實用于臨床病理鑒彆診斷組織切片內蠕蟲蟲種的分子病理學方法. 方法 製作已知的和從臨床收集的多種蠕蟲和宿主組織病理切片標本,用改良蛋白K消化法對各種蠕蟲切片的白片、HE染色片和免疫組化片組織提取DNA;設計閤成檢測併殖吸蟲、曼氏裂頭蚴和豬囊蟲各自特異性基因片段的引物,分彆對各DNA提取物作PCR擴增,經凝膠電泳觀察目的基因片段；比較分析三種蠕蟲各自最小組織量檢測的敏感性和特異性. 結果 對三種蠕蟲所選用的引物均可擴增齣清晰的特異性目的條帶.用改良蛋白K消化法提取蠕蟲DNA可PCR擴增齣目的片段的敏感性均優于商品化試劑盒提取法,可提齣DNA的最小組織麵及厚度為:肺吸蟲的為1.50 mm2,10μm;曼氏裂頭蚴的為4.87 mm2,5μm;豬囊蟲的為5.80 mm2,5μm.經10箇臨床標本檢測均穫得理想結果. 結論 本研究成功地探索齣一種對病理切片中微量組織提取DNA作PCR鑒定蟲種的簡便方法,為病理診斷提供瞭進一步鑒彆此3種蠕蟲的分子病理學手段.
목적 건립일충실용우림상병리감별진단조직절편내연충충충적분자병이학방법. 방법 제작이지적화종림상수집적다충연충화숙주조직병리절편표본,용개량단백K소화법대각충연충절편적백편、HE염색편화면역조화편조직제취DNA;설계합성검측병식흡충、만씨렬두유화저낭충각자특이성기인편단적인물,분별대각DNA제취물작PCR확증,경응효전영관찰목적기인편단；비교분석삼충연충각자최소조직량검측적민감성화특이성. 결과 대삼충연충소선용적인물균가확증출청석적특이성목적조대.용개량단백K소화법제취연충DNA가PCR확증출목적편단적민감성균우우상품화시제합제취법,가제출DNA적최소조직면급후도위:폐흡충적위1.50 mm2,10μm;만씨렬두유적위4.87 mm2,5μm;저낭충적위5.80 mm2,5μm.경10개림상표본검측균획득이상결과. 결론 본연구성공지탐색출일충대병리절편중미량조직제취DNA작PCR감정충충적간편방법,위병리진단제공료진일보감별차3충연충적분자병이학수단.
