中国癌症杂志
中國癌癥雜誌
중국암증잡지
CHINA ONCOLOGY
2013年
4期
241-247
,共7页
高雯%臧荣余%王雁%杨丽娜%刘杨%亓子豪%尹胜%杨恭
高雯%臧榮餘%王雁%楊麗娜%劉楊%亓子豪%尹勝%楊恭
고문%장영여%왕안%양려나%류양%기자호%윤성%양공
输卵管上皮细胞%p53%pRb%hTERT%永生化
輸卵管上皮細胞%p53%pRb%hTERT%永生化
수란관상피세포%p53%pRb%hTERT%영생화
Human fallopian tube epithelia cells%p53%pRb%hTERT%Immortalization
背景与目的：最近研究表明卵巢高级别浆液性癌可能起源于输卵管上皮。本课题通过基因沉默和端粒酶导入技术将原代输卵管上皮细胞永生化，为以后建立恶性转化细胞系和卵巢癌动物模型奠定基础。方法：分离并培养输卵管上皮细胞，导入p53和pRb shRNA结合hTERTcDNA，建立p53和pRb基因同时沉默并过表达hTERT的永生化细胞系，并对永生化细胞系进行连续传代、沉默基因的蛋白质印迹法(Western blot)测定、SA-β-gal染色和非停泊生长实验及体内致瘤活性鉴定。结果：我们建立了稳定表达p53、pRbshRNA和hTERT的永生化输卵管上皮细胞系：FTE248116/p53i+pRbi+hTERT及FTE312249/p53i+pRbi+hTERT。结论：可以通过导入端粒酶基因及敲除抑癌基因p53和pRb来建立永生化细胞系,并有望于构建恶性转化细胞系和人类高级别浆液性卵巢癌动物模型。
揹景與目的：最近研究錶明卵巢高級彆漿液性癌可能起源于輸卵管上皮。本課題通過基因沉默和耑粒酶導入技術將原代輸卵管上皮細胞永生化，為以後建立噁性轉化細胞繫和卵巢癌動物模型奠定基礎。方法：分離併培養輸卵管上皮細胞，導入p53和pRb shRNA結閤hTERTcDNA，建立p53和pRb基因同時沉默併過錶達hTERT的永生化細胞繫，併對永生化細胞繫進行連續傳代、沉默基因的蛋白質印跡法(Western blot)測定、SA-β-gal染色和非停泊生長實驗及體內緻瘤活性鑒定。結果：我們建立瞭穩定錶達p53、pRbshRNA和hTERT的永生化輸卵管上皮細胞繫：FTE248116/p53i+pRbi+hTERT及FTE312249/p53i+pRbi+hTERT。結論：可以通過導入耑粒酶基因及敲除抑癌基因p53和pRb來建立永生化細胞繫,併有望于構建噁性轉化細胞繫和人類高級彆漿液性卵巢癌動物模型。
배경여목적：최근연구표명란소고급별장액성암가능기원우수란관상피。본과제통과기인침묵화단립매도입기술장원대수란관상피세포영생화，위이후건립악성전화세포계화란소암동물모형전정기출。방법：분리병배양수란관상피세포，도입p53화pRb shRNA결합hTERTcDNA，건립p53화pRb기인동시침묵병과표체hTERT적영생화세포계，병대영생화세포계진행련속전대、침묵기인적단백질인적법(Western blot)측정、SA-β-gal염색화비정박생장실험급체내치류활성감정。결과：아문건립료은정표체p53、pRbshRNA화hTERT적영생화수란관상피세포계：FTE248116/p53i+pRbi+hTERT급FTE312249/p53i+pRbi+hTERT。결론：가이통과도입단립매기인급고제억암기인p53화pRb래건립영생화세포계,병유망우구건악성전화세포계화인류고급별장액성란소암동물모형。
10.3969/j.issn.1007-3969.2013.04.00X
