医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2013年
3期
228-231
,共4页
李红霞%周亚峰%蒋彬%陈弹%杨向军%蒋文平
李紅霞%週亞峰%蔣彬%陳彈%楊嚮軍%蔣文平
리홍하%주아봉%장빈%진탄%양향군%장문평
骨髓间充质干细胞%GATA-4%基因转移技术%基因治疗
骨髓間充質榦細胞%GATA-4%基因轉移技術%基因治療
골수간충질간세포%GATA-4%기인전이기술%기인치료
目的 基因修饰间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是增加细胞抗缺氧的新方向.文中通过建立稳定的基因重构MSC细胞模型研究GATA-4转染骨髓MSC的特征及鉴定,为GATA-4修饰的MSC应用于急性心肌梗死等心肌疾病的治疗提供有效的技术手段.方法 分离、培养及纯化新生大鼠MSC,用流式细胞仪进行鉴定.将培养第3代的MSC用pMSCV逆转录病毒表达系统转染GATA-4基因(MSCGATA-4),对照组为空质粒组(MSCNull).用RT-PCR、Western blot印迹和免疫组化鉴定转染的效果.结果 大鼠MSC 表面抗原CD45和CD44表达阴性,CD31表达弱(＜3%),CD90表达强阳性,其阳性率达95%.MSCGATA-4组GATA-4 mRNA和蛋白表达明显高于对照组MSCNull.MSCGATA-4组GATA-4和GFP都显示阳性,而对照组只表达GFP.结论 GATA-4成功转染到MSC,这将为研究GATA-4对MSC抗缺氧作用奠定基础.
目的 基因脩飾間充質榦細胞(mesenchymal stem cell,MSC)是增加細胞抗缺氧的新方嚮.文中通過建立穩定的基因重構MSC細胞模型研究GATA-4轉染骨髓MSC的特徵及鑒定,為GATA-4脩飾的MSC應用于急性心肌梗死等心肌疾病的治療提供有效的技術手段.方法 分離、培養及純化新生大鼠MSC,用流式細胞儀進行鑒定.將培養第3代的MSC用pMSCV逆轉錄病毒錶達繫統轉染GATA-4基因(MSCGATA-4),對照組為空質粒組(MSCNull).用RT-PCR、Western blot印跡和免疫組化鑒定轉染的效果.結果 大鼠MSC 錶麵抗原CD45和CD44錶達陰性,CD31錶達弱(＜3%),CD90錶達彊暘性,其暘性率達95%.MSCGATA-4組GATA-4 mRNA和蛋白錶達明顯高于對照組MSCNull.MSCGATA-4組GATA-4和GFP都顯示暘性,而對照組隻錶達GFP.結論 GATA-4成功轉染到MSC,這將為研究GATA-4對MSC抗缺氧作用奠定基礎.
목적 기인수식간충질간세포(mesenchymal stem cell,MSC)시증가세포항결양적신방향.문중통과건립은정적기인중구MSC세포모형연구GATA-4전염골수MSC적특정급감정,위GATA-4수식적MSC응용우급성심기경사등심기질병적치료제공유효적기술수단.방법 분리、배양급순화신생대서MSC,용류식세포의진행감정.장배양제3대적MSC용pMSCV역전록병독표체계통전염GATA-4기인(MSCGATA-4),대조조위공질립조(MSCNull).용RT-PCR、Western blot인적화면역조화감정전염적효과.결과 대서MSC 표면항원CD45화CD44표체음성,CD31표체약(＜3%),CD90표체강양성,기양성솔체95%.MSCGATA-4조GATA-4 mRNA화단백표체명현고우대조조MSCNull.MSCGATA-4조GATA-4화GFP도현시양성,이대조조지표체GFP.결론 GATA-4성공전염도MSC,저장위연구GATA-4대MSC항결양작용전정기출.
