中华肺部疾病杂志(电子版)
中華肺部疾病雜誌(電子版)
중화폐부질병잡지(전자판)
CHINESE JOURNAL OF LUNG DISEASE(ELECTRONIC EDITION)
2013年
5期
34-39
,共6页
张巧%刘进%刘聚伟%万敏%吴颖%李瑾%王长征%马千里
張巧%劉進%劉聚偉%萬敏%吳穎%李瑾%王長徵%馬韆裏
장교%류진%류취위%만민%오영%리근%왕장정%마천리
肺炎链球菌表面蛋白A%DNA疫苗%鼻咽部定植%黏膜免疫%减毒沙门菌
肺炎鏈毬菌錶麵蛋白A%DNA疫苗%鼻嚥部定植%黏膜免疫%減毒沙門菌
폐염련구균표면단백A%DNA역묘%비인부정식%점막면역%감독사문균
Streptococcus pneumonia surface A%DNA vaccine%Nasopharyngeal colonization%Mucosal immunization%Salmonella
目的 评价以减毒沙门菌为载体携带PspA不同家族亚类优势抗原的肺炎链球菌DNA疫苗对不同侵袭性肺炎链球菌定植的防御作用,探讨优化肺炎链球菌DNA疫苗增强鼻咽部黏膜免疫的策略.方法 应用分子克隆技术,在前期研究基础上,制备携带PspA不同家族亚类优势抗原(PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3)的减毒沙门菌为宿主菌的非抗性基因筛选的真核质粒-宿主致死平衡系统,应用RT-PCR和免疫印迹技术检测优势抗原的表达情况,并在含或不含DAP的SOB培养基中传代培养,抽提质粒PCR检测疫苗携带抗原的稳定性.以PBS为对照,口服免疫接种BABL/c小鼠,ELISA检测鼻咽部sIgA的水平;应用小鼠鼻咽部定植模型检测疫苗对不同侵袭性肺炎链球菌定植的防御作用.结果 成功构建出携带PspA不同家族亚类优势抗原(PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3)的减毒沙门菌为宿主菌的非抗性基因筛选的真核质粒-宿主致死平衡系统,且稳定性好;免疫小鼠鼻咽部抗PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3的特异性sIgA的水平显著高于对照组(P<0.01);免疫小鼠鼻咽部肺炎链球菌定植模型的菌落计数较对照组明显减少(P<0.01).结论 以减毒沙门菌为载体携带PspA不同家族亚类优势抗原是增强肺炎链球菌DNA疫苗鼻咽部黏膜免疫的优化策略.
目的 評價以減毒沙門菌為載體攜帶PspA不同傢族亞類優勢抗原的肺炎鏈毬菌DNA疫苗對不同侵襲性肺炎鏈毬菌定植的防禦作用,探討優化肺炎鏈毬菌DNA疫苗增彊鼻嚥部黏膜免疫的策略.方法 應用分子剋隆技術,在前期研究基礎上,製備攜帶PspA不同傢族亞類優勢抗原(PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3)的減毒沙門菌為宿主菌的非抗性基因篩選的真覈質粒-宿主緻死平衡繫統,應用RT-PCR和免疫印跡技術檢測優勢抗原的錶達情況,併在含或不含DAP的SOB培養基中傳代培養,抽提質粒PCR檢測疫苗攜帶抗原的穩定性.以PBS為對照,口服免疫接種BABL/c小鼠,ELISA檢測鼻嚥部sIgA的水平;應用小鼠鼻嚥部定植模型檢測疫苗對不同侵襲性肺炎鏈毬菌定植的防禦作用.結果 成功構建齣攜帶PspA不同傢族亞類優勢抗原(PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3)的減毒沙門菌為宿主菌的非抗性基因篩選的真覈質粒-宿主緻死平衡繫統,且穩定性好;免疫小鼠鼻嚥部抗PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3的特異性sIgA的水平顯著高于對照組(P<0.01);免疫小鼠鼻嚥部肺炎鏈毬菌定植模型的菌落計數較對照組明顯減少(P<0.01).結論 以減毒沙門菌為載體攜帶PspA不同傢族亞類優勢抗原是增彊肺炎鏈毬菌DNA疫苗鼻嚥部黏膜免疫的優化策略.
목적 평개이감독사문균위재체휴대PspA불동가족아류우세항원적폐염련구균DNA역묘대불동침습성폐염련구균정식적방어작용,탐토우화폐염련구균DNA역묘증강비인부점막면역적책략.방법 응용분자극륭기술,재전기연구기출상,제비휴대PspA불동가족아류우세항원(PspA-Fam1-Clade1화PspA-Fam2-Clade3)적감독사문균위숙주균적비항성기인사선적진핵질립-숙주치사평형계통,응용RT-PCR화면역인적기술검측우세항원적표체정황,병재함혹불함DAP적SOB배양기중전대배양,추제질립PCR검측역묘휴대항원적은정성.이PBS위대조,구복면역접충BABL/c소서,ELISA검측비인부sIgA적수평;응용소서비인부정식모형검측역묘대불동침습성폐염련구균정식적방어작용.결과 성공구건출휴대PspA불동가족아류우세항원(PspA-Fam1-Clade1화PspA-Fam2-Clade3)적감독사문균위숙주균적비항성기인사선적진핵질립-숙주치사평형계통,차은정성호;면역소서비인부항PspA-Fam1-Clade1화PspA-Fam2-Clade3적특이성sIgA적수평현저고우대조조(P<0.01);면역소서비인부폐염련구균정식모형적균락계수교대조조명현감소(P<0.01).결론 이감독사문균위재체휴대PspA불동가족아류우세항원시증강폐염련구균DNA역묘비인부점막면역적우화책략.